简介
异柠檬酸脱氢酶（isocitratedehydrogenase，IDH）催化异柠檬酸（isocitrate）氧化 脱氢生成中间产物草酰琥珀酸（oxalosuccinate），然后进一步氧化脱羧生成α－酮戊二酸（ox－ketoglutarate，α－KG），同时生成 NADPH。该酶大量存在于肝、骨骼肌和肾等组织中，其活性高低反映出细胞的生物合成和抗氧化能力。细胞中存在着两种类型的 IDH，其中线粒体中的 IDH 以 NAD＊为辅酶，而胞质中的 IDH 则主要以 NADP＊为辅酶。
原理
异柠檬酸脱氢酶活性检测的基本原理是：其测定原理是加入氧化性 NADP＊或 NAD＇反应底物，IDH 酶可催化其生成还原性 NADPH 或 NADH，并在 340 nm 处有最大吸光度。通过测定 NADH 或 NADPH 的浓度，计算 IDH 酶活性。
材料与仪器
氧化性 NADP＊或 NAD＇反应底物
步骤
异柠檬酸脱氢酶活性检测的基本流程如下：
A、加入氧化性 NADP＊或 NAD＇反应底物，在 IDH 酶的催化下生成还原性 NADPH 或 NADH；
B、在 340 nm 处有检测吸光度，测定 NADH 或 NADPH 的浓度，计算 IDH 酶活性。
来源：丁香实验
