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        黏液物质染色

        相关实验:糖类染色实验

        最新修订时间:

        原理

        在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。

        材料与仪器

        步骤

        Schiff 染色液:碱性复红 1 g,1mol/L 盐酸 20 ml,焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)2 g,双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸,稍有火焰,加入 1 g 碱性复红,再煮沸 1 min,冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸,待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色,5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好,放入冰箱中保存待用。


        阿尔辛蓝染色液:阿尔辛蓝 8 GS 1 g,冰醋酸 3 ml,蒸馏水 97 ml。用前过滤,在溶液中加入麝香草酚 2 粒防腐。pH 值为 2.6~3.00 之间。


        1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


        2. 蒸馏水浸洗 1 min。


        3. 3% 乙酸液处理 3 min。


        4. 阿尔辛蓝染色液染色 30 min,蒸馏水洗 2 次。


        5. 3% 乙酸液处理 1 min,蒸馏水洗 2 次。


        6. 高碘酸氧化 10 min。


        7. 自来水冲洗,蒸馏水浸洗 2 次。


        8. 在 Schiff 染色液中染色 10~20 min(根据室温可适当延长或缩短时间)。


        9. 自来水浸洗 2 min(不宜在水中停留时间过长,以免背景较深)。


        10. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

        注意事项

        1. 阿尔辛蓝染色液使用时不能摇动,防止污染组织切片。


        2. 高碘酸氧化液不能存放时间较长,防止失去氧化效果。

        常见问题

        结果:中性黏液物质呈红色,酸性黏液物质呈蓝色,中性和酸性黏液混合物质呈紫红色。

        来源:丁香实验

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