方案12 蛋白质阵列：标记复合体并通过阵列检测来研究蛋白质-小分子相互作用

最新修订时间：2024-05-13

材料与仪器

实验材料	载有蛋白质阵列的玻片用于标记的小牛血清白蛋目标小分子
试剂、试剂盒	磷酸盐缓冲溶液含有 500mmol L甘氨酸的 PBS 单功能活性染料Cy-3或Cy-5 含 0.01g ml小牛血清白蛋白（BSA)的 PBST 二琥珀酰亚胺戊二酸（DSG)硫代琥珀酰亚胺酯 N’-二琥珀酰亚胺碳酸盐 N
仪器、耗材	荧光玻片扫描仪孵育箱凝胶过滤装置保湿器

步骤

一、BSA 的标记

① 将 I m g B S A 溶于 0 •5m l的 P B S (PH7.5 ) 中，然后将溶液倒入装有单功能活性染料（ Cy- 3 或 Cy- 5 ) 的管中。 ② 室温条件下，孵育 B S A 和染料的混合物30min。 ③ 在溶液中加人100//1含 500mmol/L 甘氨酸（ pH 8. 0 ) 的 P B S ，以终止反应。在室温条件下继续孵育30min。 ④ 用凝胶过滤除去未掺入的染料，用 P B S (p H 7. 5 ) 作洗脱缓冲液。