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        低涨处理地衣红染色观察法

        相关实验:支原体的检测实验

        最新修订时间:

        原理

        本法为固定染色法,简便易行,标本可长期保存,不仅适于检测支原体,亦可用于检测真菌和细菌。

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  取材

        用支持物盖片培养法或培养液均可;用培养液时,先吸取培养液1 毫升,
        500~800 转/分,离心5 分钟后去上清,余0.2 ml备用。

        2.  低涨处理

        用新鲜配制的0.5 %的枸橼酸溶液,处理盖片细胞或加入到1项0.2 ml
        中(悬液)置10 分钟。

        3.  固定

        用新配制的Carnoy液固定两次,共10 分钟,取出盖片凉干;如为培养液,
        则应先离心弃上清固定液,余沉淀物0.2 ml,制成涂片2~3 张。

        4.  染色

        用2 %醋酸地依红染5 分钟

        染液配法:
        地衣红 2 g,冰醋酸 60 ml,加蒸馏水至100 ml,支原体和细胞被染成紫红色,如染色过深可用 75 %酒精脱色。

        5.  封片

        纯酒精过三次,每次1 分钟,封入Euparal 或树胶中。镜下观察支原体呈
        暗紫色小体,附于细胞外或散在于细胞之间。

        来源:丁香实验

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