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        IL-4生物学活性检测

        相关实验:IL-4 生物学活性检测实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        一、IL-4生物学活性测定
         
        CT.4S细胞悬液制备①
        接种细胞于96孔培养板②

        加待测样品和标准品③
        加3H-TdR④

        收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤
        绘制标准曲线,计算待测样品的IL-4的活性单位⑥

        注意事项

        ①用0.25%胰酶消化、收集生长旺盛的贴壁CT.4S细胞;经Hank’s液离心洗涤2次后,10%FCS-RPMI-1640培养液调制细胞浓度为1×105/ml。

        ②接种细胞于96孔细胞培养板,每孔0.1 ml。

        ③加入适当稀释的待测样品和标准品,每孔0.1 ml。每个样品设3个复孔,同时设培养液对照。37度,5%CO2孵育48小时。

        ④与⑤同IL-2。

        ⑥以cpm为纵坐标,对应的不同稀释浓度IL-4标准品浓度为横坐标,在半对数图纸上绘制出标准曲线,再从标准曲线上查出待测样品中的IL-4含量。

        关键点在IL-4诱生过程中,常同时产生一定量的IL-2,将影响IL-4的检测结果。因此,最好采用IL-2mAb吸附剂除去IL-2。

        来源:丁香实验

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