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        β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析

        相关实验:非同位素分析报道基因活性实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  用PBS分别洗涤两次60 mm 培养皿中的转染β-半乳糖苷酶表达质粒的细胞及模拟转染的细胞。
         
        2.  加入250 μl Triton裂解液,用一橡胶细胞刮子将细胞刮下来。将细胞提取物转移至1 个1.5 ml 微量离心管中。在4℃以最大速度离心2 min,将上清转移至一个干净的微量离心管中。
         
        3.  在一只发光计的测试管中加2~20 μl 细胞提取液。再加200 μl β-半乳糖苷酶反应缓冲液,在室温下温育60 min。
         
        4.  将测试管放入发光计中,注人300 μl 光发射加速液。注入后等2~5 s,然后测定5 s。

        来源:丁香实验

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