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        植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法)

        相关实验:植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法)

        最新修订时间:

        原理

        糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质,其在可见光区620nm波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。


        此法可用于单糖、寡糖和多糖的含量测定,并具有灵敏度高,简便快捷,适用于微量样品的测定等优点。

        材料与仪器

        步骤

        1.葡萄糖标准曲线的制作


        取6支20ml具寒试管,编号,按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。


        在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,摇匀后,打开试管塞,置沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却至室温,在620nm波长下比色,测各管溶液的光密度值(OD),以标准葡萄糖含量为横坐标,光密度值为纵坐标,作出标准曲线。




        2.样品中可溶性糖的提取


        称取1克白菜叶,剪碎,置于研钵中,加入少量蒸馏水,研磨成匀浆,然后转入20ml刻度试管中,用10ml蒸馏水分次洗涤研钵,洗液一并转入刻度试管中。置沸水浴中加盖煮沸10分钟,冷却后过滤,滤液收集于100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,摇匀备用。


        3.糖含量测定


        用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度试管中,加1ml水和0.5ml蒽酮试剂。再缓慢加入5ml浓H2SO4(注意:浓硫酸遇水会产生大量的热!),盖上试管塞后,轻轻摇匀,再置沸水浴中10分钟(比色空白用2ml蒸馏水与0.5ml蒽酮试剂混合,并一同于沸水浴保温10分钟)。冷却至室温后,在波长620nm下比色,记录光密度值。查标准曲线上得知对应的葡萄糖含量(μg)。


        五、结果计算

        注意事项

        1、加浓H2SO4时应缓慢加入,以免产生大量热量而爆沸,灼伤皮肤,如出现上述情况,应迅速用自来水冲洗。


        2、水浴加热时应打开试管塞。

        常见问题

        蒽酮法测定可溶性糖因其准确性高、重现性好、操作简便、快速、灵敏等优点而被广泛应用于各种植物组织中可溶性糖含量的测定。

        参考:《蒽酮法测定红枣可溶性糖含量条件的优化》食品科学

        来源:丁香实验

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