- ￥1197.90
- 阿拉丁
- 上海
- O665690
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存
- 英文名：
OminiPlant RNA Kit (Dnase I)
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
O665690-50T
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产品简介
本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA，即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA，如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣，香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方，可使细胞中的RNA酶迅速灭活，有效去除多糖多酚对RNA提取的影响，无需苯酚、氯仿等试剂，同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化，提取的总RNA纯度高，无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。
RNA得率
自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇（新开封或提取RNA专用）
实验前准备及重要注意事项
1．预防RNase污染，应注意以下几方面：
1）使用无RNase的塑料制品和枪头。
2）操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2．提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3．Buffer RLS如果产生沉淀，请加热使其溶解后室温放置。
4．Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇，1 ml Buffer RLS加20 μl β-巯基乙醇。加入 β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
5．第一次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。
操作步骤
1．匀浆处理：取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末，加入500 μl Buffer RLS （使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀。
注意：对于含水量极其丰富的材料，如西瓜果肉，西红柿，梨果肉等，可以适当多加入些材料，最多可增加至200mg；对于富含淀粉的样本或成熟叶片，可适当增加Buffer RLS的用量，最多可增加至700μl。
2．4°C 12,000 rpm（~13,400×g）离心2分钟。
3．将上清液转入已装入收集管的过滤柱（Spin Columns FS）中，4°C 12,000 rpm离心1分钟，小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管（自备）中， 枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
4．缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱（Spin Columns RM）中，若一次不能将 全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入。4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
5．向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1，4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6．配制DNase I 混合液：取52 μl RNase-Free Water，向其中加入8 μl 10×Reaction Buffer和20 μl DNase I（1 U/μl），混匀， 配制成终体积为80 μl的反应液。
7．向吸附柱中直接加入80 µl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。
8．向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1，4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9．向吸附柱RM中加入500 μl Buffer RW2（使用前检查是否加入无水乙醇）, 4°C 12,000 rpm 离心1 分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10．重复步骤9。
11．4°C 12,000 rpm离心2分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12．将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes（1.5 ml）中，向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50 μl RNase-Free Water，室温放置2分钟，4°C 12,000 rpm离 心1分钟，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
注意：1） RNase-Free Water体积不应小于30 μl，体积过小影响回收率。
2） 如果要提高RNA的产量，可用30-50 μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
3） 如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤12。
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文献和实验大小不一样的引物对。3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱RA上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。6. RNA 纯度及浓度检测:完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAprep Pure 多糖多酚植物总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP441）
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