双缩脲法

1.标准曲线的绘制 取6支试管从0～5编号，按下表分别加入各 试剂 ，每加一种试液均须混匀，加毕后于室温放置30分钟，然后以0号管作为空白对照管，540nm处测定各管A值。 以标准酪蛋白（mg）为横坐标，A 540值为纵坐标，绘制标准曲线。 2.未知浓度的样液测定 可用牛奶中提取的酪蛋白配制溶液。未知酪蛋白浓度的样品测定3管。方法步骤与上述标准曲线制作过程的5号管相同，仅用未知浓度酪蛋白溶液1.0mL代替标准酪蛋白。 3.标准曲线的制作与未知浓度蛋白测定过程是同时进行的。 根据未知浓度酪蛋白试液的A540值，在标准曲线上查出其对应的蛋白毫克数，即为所测酪蛋白溶液的质量浓度(mg/mL)。