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🔥 病毒包装与转染
质粒DNA 和其他包装质粒共转染至细胞(293T 细胞)产生病毒,称为病毒包装。
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黑色素瘤皮下荷瘤模型构建
B16F10 黑色素瘤皮下荷瘤模型操作简单,成本较低,可重复性强,实验周期相对较短,是研究黑色素瘤常用的动物模型。
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血脑屏障体外模型的建立
血脑屏障 (Blood-Brain Barrier, BBB) 是由微血管内皮细胞、基底膜和周围星形胶质细胞组成的一种高度特化的生物屏障,能够保护中枢神经系统 (Central Nervous System, CNS) 免受外界有害物质的侵害。人脑微血管内皮细胞是构建血脑屏障的重要细胞类型,其主要作用是通过细胞间紧密连接和特殊的转运通道,限制了大多数药物、病原体和其他有害物质的通过,同时保留了对神
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干细胞的分离培养
人子宫内膜是一个高度再生的组织,这种巨大的再生能力被认为与人类子宫内膜干细胞有直接关系。子宫内膜干细胞分类较为多样化,包括子宫内膜细胞侧群(side population,SP)、子宫内膜间充质干细胞、月经血来源的干细胞等。子宫内膜间充质干细胞(enMSCs)是一类具有自我更新能力、分化潜力、低免疫原性、低致瘤性等生物学特性的新型成体干细胞。
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细胞成球实验
肿瘤干细胞 (CSC) 是指肿瘤内不仅具有自我更新能力还拥有较强侵袭迁移能力的那一小部分细胞,常常在化疗治疗后驱动肿瘤恶变和复发,与肿瘤的存活、增殖、转移和复发密切相关。传统上,肿瘤干细胞会从癌细胞系和肿瘤活检组织中分离出来,并在三维肿瘤球状体悬浮培养物中生长,成球能力是肿瘤干细胞体外鉴定的一个重要方法,目前肿瘤细胞的成球实验(成球大小及数目)是衡量肿瘤细胞干性的主要手段。判断单个细胞在适宜的条件
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微生物超氧化物歧化酶(SOD)活性测定
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微生物的培养和鉴定
分枝杆菌培养包括改良罗氏培养和液体培养(如 BD MGIT 960 液基培养)。目前,固体罗氏培养法是我国最常用的实验室结核杆菌培养方法,该方法非常具有代表性。结核杆菌在固体培养基上生长,菌落形态清晰可见,其中菌落形态较典型的样本可以通过直接观察菌落的形态即可做鉴别,因此固体罗氏培养法常用于临床疑似结核病标本的分离培养、鉴别、保存菌种及抗结核药物敏感性测定等。而且相较于涂片检查法,改良罗氏固体培养
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病原菌毒力测定
毒力表示病原体致病能力的强弱,构成细菌毒力的物质称为毒力因子,主要有侵袭力(病原菌在机体内定殖、突破机体防御屏障和内化作用、繁殖和扩散的能力)和毒素。病原菌毒力的评估常常通过感染模型进行,常见的感染模型包括体外模型(细胞感染模型)及体内模型(动物感染模型);而在非脊椎动物感染模型中,昆虫有其复杂的先天免疫系统,与哺乳动物高度相似,它们被认为是大型哺乳动物细菌毒力研究的合适替代模型。
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斑点杂交实验
斑点杂交(dotblot)是一种检测、分析和鉴定 DNA、RNA 和蛋白质的技术,通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度。作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 RNA 转录后修饰,m6A 修饰能够调控 RNA 的剪接与转运、稳定性、出核和翻译成蛋白质的效率。因此在研究 RNA 的 m6A 修饰时经常用到斑点杂交来对细胞内总 RNA 的 m6A 修饰水平进行定性或半定量分析。
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DNA 损伤
DNA 损伤
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🔥 组织蛋白质的提取
蛋白质是生命体中最重要的基本组成部分之一,它们在细胞的结构和功能中起着至关重要的作用。因此,研究蛋白质的结构和功能对于理解生命体的基本机制和开发新药物具有重要意义,而蛋白质提取是研究蛋白质的关键步骤之一。
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内皮细胞的通透性检测
内皮屏障功能的变化可调控血管向组织的渗漏,以维持稳态。内皮细胞通透性改变在多种疾病的病理生理过程中具有重要的意义,目前已建立了一系列体内外内皮细胞屏障通透性的检测方法。
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荧光共振能量转移(FRET)
荧光共振能量转移(FRET)
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基因注释 prokka
原核生物全基因组组装测序已有了较为成熟的方法体系,但是在组装好的基因组注释上还没有较为快捷简便的方法。Prokka: rapid prokaryotic genome annotation,快速的原核基因组注释,是一个适用于原核生物基因组的快速高效的自动注释工具,以 FASTA 格式的预组装基因组 DNA 序列为输入文件,能够对原核基因组和宏基因组进行快速高效的功能注释,在基因组序列上识别和标记所
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最小抑菌浓度(MIC)测定
最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)是指能够抑制微生物生长、繁殖的最低药物浓度。MIC 测试方法有很多种,常见的测试方法有如下三种:微量稀释法、琼脂稀释法、E-test 法。
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MTT 法检测细胞毒性与增殖
MTT 法对细胞生长状况的检测实验是通过 MTT(化学名称为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名为噻唑蓝)对细胞生长检测的常用方法。该法以其灵敏性高、重复性好、操作简便、经济安全,而得到广泛应用。
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质粒转化大肠杆菌
质粒转染大肠杆菌可应用于:(1)细菌株的构建;(2)细胞工程;
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🔥 分子克隆技术
分子克隆是将重组DNA插入到载体中的一套方法,载体作为DNA分子的携带者,将在宿主体内复制重组DNA片段。
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染色质开放性测序
染色质可及性通常也理解为染色质的开放程度。DNA 的复制以及转录,都需要将染色质的紧密结构打开,从而允许一些调控蛋白(比如转录因子和辅因子)与 DNA 结合。这部分被打开的染色质被称为开放染色质,其允许调控蛋白结合的特性称为染色质的可及性。ATAC-seq(Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequenc
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免疫共沉淀质谱
免疫共沉淀是一种用于从复杂混合物中富集或纯化特定蛋白质的技术,然后结合质谱可以鉴定特定蛋白的相互作用蛋白。
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