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斑点杂交实验
实验分类：
其他实验
最新修订时间：
合作专家 | 曾倩晖博士
动物遗传育种繁殖 华中农业大学
审核专家 | 聂壹峰博士
纳米生物医学 中国科学院大学
简介
斑点杂交（dotblot）是一种检测、分析和鉴定 DNA、RNA 和蛋白质的技术，通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度。作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 RNA 转录后修饰，m6A 修饰能够调控 RNA 的剪接与转运、稳定性、出核和翻译成蛋白质的效率。因此在研究 RNA 的 m6A 修饰时经常用到斑点杂交来对细胞内总 RNA 的 m6A 修饰水平进行定性或半定量分析。
原理
m6A 斑点杂交是指将待测的 RNA 变性后点加在硝酸纤维素膜或 NC 膜上，紫外交联固定后用 m6A 抗体进行杂交，洗膜，放射自显影，以斑点有无或颜色的深浅代表 m6A 修饰水平的高低。
来源：
操作方法
斑点杂交（dotblot）是一种检测、分析和鉴定 DNA、RNA 和蛋白质的技术，通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度。作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 RNA 转录后修饰，m6A 修饰能够调控 RNA 的剪接与转运、稳定性、出核和翻译成蛋白质的效率。因此在研究 RNA 的 m6A 修饰时经常用到斑点杂交来对细胞内总 RNA 的 m6A 修饰水平进行定性或半定量分析。
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