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        细胞表面标记的检测技术

        实验分类:

        细胞实验

        最新修订时间:

        简介

        淋巴细胞表面标记主要包括表面受体和表面抗原,淋巴细胞表面标记的检测已广泛用于基础、临床免疫学研究和患者免疫功能的测定。检测方法主要应用同位素、酶和荧光素及其它标记技术。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)  

        来源:丁香实验

        操作方法

        碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记

        1. 分离外周血单个核细胞(PBMC),洗涤后用含10 %FCS PMI1640调整细胞浓度约5×106 /ml      2. 自制制片机上制片,充分干燥          3. 用含丙酮-福尔马林固定液中固定30 秒钟                 4. 自来水、蒸馏水依次冲洗                 5. 用TBS稀释特异性McAb或阴性对照抗体(1∶

        活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

        1. 制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法)                  2. 用10 %FCS RPMI1640调整细胞浓度为5×106~1×107 /ml          3. 取40 μl细胞悬液加入预先有特异性McAb(5~50 μl)的小玻璃管或塑料离心管,再加50 μl 1∶20(用DPBS稀释)灭活正常兔血清,4 ℃

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