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        PI3K/Akt/mTOR 信号通路

        实验分类:

        细胞实验

        最新修订时间:

        简介

        PI3K/Akt/mTOR信号通路可以:(1)诱导缺氧诱导因子1的表达和活性;(2)作为细胞内非常重要的信号转导途径;(3)在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。

        来源:丁香实验

        操作方法

        特异性阻断法

        一、细胞株表达情况监测 1. 在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上,以免疫印迹方法(Western blot)检测各细胞株中PI3K(p110α亚单位)、PTEN、pAkt(S473,T308)和p-mTOR(S2448)的表达情况。 2. 分别用 PI3K抑制剂LY294002(50 umol/ml)和mTOR抑制剂Rapamycin(RAPA,50

        mTOR抑制剂作用法

        一、细胞表达检测 1. 分别取对数生长期的HepG2和Hep3B细胞,以不同浓度的DOX单用或与RAPA(20 nmol/ml)联合应用培养48 h或24h。 2. 以MTT法测定药物对HepG2和Hep3B细胞的增殖抑制作用,以流式细胞技术检测二者的凋亡情况,以 Western blot法检测者P-p70S6K(T389)、P-4E-BP1(S65)和pS6(S235/236)的

        样本比较法

        一、细胞表达检测 1. 76例HCC组织样本经临床病理分期分级。 2. 免疫组织化学方法检测HCC组织和癌旁组织中p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6的表达情况。 3. 分析上述指标在不同HCC病理特征条件下的阳性表达率,并与正常肝组织比较。 二、细胞表达结果 1. p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6在人HCC组织有不同程度的表达,H

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