细胞实验

本实验介绍制备用于生长 CEF 单层细胞活体免疫染色的刀豆蛋白 A 包被的培养板。来源《精编分子生物学实验指南（第五版）》

减毒的复制缺陷痘苗病毒 Ankara（MVA），作为标准痘苗病毒株的替代物，可以作为载体表达外源蛋白。MVA 是痘苗病毒 Ankara 在鸡胚成纤维细胞中通过多次传代（>570 次）得到的。尽管MVA可以高效表达重组蛋白，但其在人类和大部分哺乳动物细胞中不能包装成具有感染能力的病毒颗粒，因此需制备专门用于培养 MVA 的鸡胚成纤维细胞。本实验主要介绍鸡胚成纤维细胞的制备。内容来源于《精编分子

分离获得ASC后，可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后，传代2〜3次，ASCs呈现单层，大而扁的细胞形态，其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时，它们形态上呈纺锤体形，类似于成纤维细胞。来源：《人干细胞培养》

干细胞和祖细胞群体存在于多种成体组织中，包括皮肤、肌肉、骨髓和脂肪。越来越多的研究表明这些细胞可能具有多系分化的潜能，能够生成除来源组织以外的细胞类型。近年来，人们发现成体脂肪组织可作为间充质干细胞另外一个丰富的来源。这残细胞被命名为脂肪来源的干细胞（ASCs)。在特定的培养条件下，ASCs可诱导分化为多种间充质和神经类型细胞。来源：干细胞培养

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

角膜间质细胞，即已知的角膜细胞，表现为静息的表型，以独特的树突状形态为特征，在体内的增殖率非常低下近乎没有。在急性损伤时，角膜细胞开始有丝分裂，呈成纤维细胞形态，迁移至损伤区域。在体外，原代的角膜细胞在无血清或低丝裂原血清培养基中能够维持静止状态，与体内静止的角膜细胞在细胞形态和基质分泌作用方面相似。胎牛血清能够使角膜细胞增殖，但是也能够使角膜细胞变为成纤维细胞或成肌纤维细胞。来源：《人干细胞培养

来源：《人干细胞培养》

培养中的MSCs最好通过克隆形成试验和向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的三系分化能力进行评估。但是，细胞表面标记分析有利于分析造血细胞的污染程度。来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

来源：《人干细胞培养》

脐带血（UCB)是出生后脐带（UC)和胎盘中的血液。近年来逐渐认识到UCB是HSCs和其他干细胞的一个重要来源，还具有操作和伦理的优势。从]988年第一例UCB移植治疗范可尼贫血的儿童后，由于其低病毒接触，在1〜2个HLA位点不匹配的无关供者移植时严重GVHD的发生率降低，而骨髓移植则需要严格的供、受者组织相容性匹配，UCB移植已成为一种安全和可接受的HSC移植模式。来源：《人干细胞培养》

来源：《精编分子生物学实验指南》第五版

从培养细胞中分离的细胞核制备的提取物能够在体外精确地转录并进行mRNA加工。因此这些提取物可以直接用于功能研究，并作为纯化这些过程所涉及的蛋白质的起始材料。

本章重点关注人胚胎干细胞来源、特征和常规的培养以及围绕这些细胞生长、增殖和冻存中的一些问题。 作者： 斯泰赛等,主译：章静波，本实验来自「人干细胞培养」

将介绍高浓度的慢病毒载体的原理。