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        脂肪干细胞培养和扩增实验

        实验分类:

        细胞实验

        最新修订时间:

        简介

        分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》

        来源:丁香实验

        操作方法

        脂肪干细胞的原代培养

        (a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基,从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。

        脂肪干细胞的传代培养

        (a)细胞达到80%汇合时即可传代。(b)弃去培养基,加人PBSA洗涤贴壁细胞。(c)加入足量胰蛋白酶,使之覆盖细胞,将培养瓶中,置于37℃,5% CO2温箱中。(d)细胞与胰蛋白酶共孵育3 min后,用细胞刮将细胞刮下。(e)加人ASC培养基使胰蛋白酶失活。(f)按照1:2比例,将细胞接种至2个T-25培养瓶中。

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