微生物实验

由多聚赖氨酸包被（Thermo公司产品），具有持久的生物粘附性，可附冰冻和石蜡包埋的切片，可随后离心并进行细胞学印迹试验的载玻片。

石蜡切片（paraffin section）组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是，保持细胞、组织的固有形态和结构，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应。

酵母细胞破碎可应用于生物工程提取活性物质。

细胞核（nucleus）是细胞中最大、最重要的细胞器（初中老教材认为细胞核不是细胞器，大学细胞生物学则认为是细胞器，这里以大学教材为准），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 几部分组成。

原生质体由原生质分化形成，具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等，而细菌如核糖体、拟核等。

原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，有此可得粗RNA制品。

酵母分子生物学研究常常需要分离质粒及酵母菌染色体DNA，质粒DNA用来转化大肠扞菌，而染色体DNA用于Southern 杂交分析，聚合酶链式反应法体外扩增或整合性质粒的克隆。

尽管整合性转化的频率很低，但可以通过与整合位点同源的克隆化基因内的限制性位点将质粒线性化以提高转化效率。得到的整合体含有完整的质粒，两侧为基因的完整拷贝。

在非选择性生长条件下，大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丟失频率大约1%，采用本方案不易分离除去的一个质粒是内源性2 μm 质粒，2 μm DNA自发丢失的频率约为每代10-4。

用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1，它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。

转化（transformation）是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。这现象首先发现于细菌，也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种，它不同于通过噬菌体感染传递遗传物质的转导以及通过细菌细胞的接触而转移DNA的细菌接合。

由于β-半乳糖苷酶的检测简单、敏感，因此，酵母菌基因经常以lacZ基因的功能部分作标签，来指示待研究酵母菌基因的表达调节功能。

诱变可通过测定抗刀豆氨酸突变型出现的频率的对照试验来监测。在最佳诱变条件下，抗刀豆氨酸的突变频率，诱变后应该是未诱变的100倍以上。一般取得特定类型的突变体的频率完全取决于所要寻找的突变的性质。

将减数分裂产物从子囊中释放出来，通过超声破裂，直接铺在琼脂平板上，孢子菌落可以通过影印平板法来筛选目的基因型。

制作解剖针需要有耐心和实践经验。一般的做法是首先做一根长而细的玻璃丝，将其截成多个小片段，然后再将每一个小片段粘合到毛细管的一端。做好后的针呈“L”形， 短臂长约1.3 cm，针尖直径约40~150 μm。

酵母菌四分体分析需要一台标准光学显微镜，显微镜载物台应可以沿x与y轴方向移动，并且可以精确地测量移动的距离，但不需上下移动。

二倍体酵母菌细胞处于氮源和碳源均饥饿的状态时，可诱导减数分裂和孢子形成。此时，它们的染色体复制，进行二次分裂产生单倍体核。

酵母菌菌株可于-70℃保存在15%甘油中（可存活5年以上），或于4℃保存在添加马铃薯淀粉的丰富培养基斜面上（可存活1~2年）。

糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸和气体；有些细菌只产酸不产气。例