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简介
来源:丁香实验
操作方法
1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2. 将1.5 ml 的过夜培养物转移到微量离心管中,室温高速离心5 s,倒掉上清,快速振荡分散沉淀物。 3. 细胞用200 μl 破菌缓冲液重悬,加0.3 g 玻璃珠(约200 μl 体积)及200 μl 酚
备选方案1. 在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。 2. 培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min,吸出或倒掉上清,细胞用0.5 ml水重悬。 3. 将重悬细胞转移至离心管中,室温下离心5 s,倒掉上清,在旋涡混合器上快速振荡分散菌体沉淀。 4. 细胞用200