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        胰岛素功能相关检测实验

        实验分类:

        实验动物

        最新修订时间:

        简介

        目前,胰岛素功能相关检测实验主要有【5】种:膳食糖耐量试验(MTT)、腹腔或口服葡萄糖耐量试验(IPGTT 或 OGTT)、胰岛素耐受实验(ITT)、小鼠胰岛的分离纯化和分离胰岛的糖刺激下胰岛素分泌检测(GSIS)。

        来源:丁香实验团队

        操作方法

        腹腔或口服葡萄糖耐量试验

        同所有的代谢和内分泌测试一样,小鼠遗传背景是很重要的。糖耐量试验表明肝脏浓缩和储存葡萄糖的效率,胰腺产生胰岛素的能力,有活性的胰岛素的量及体细胞对其的灵敏度。OGTT 优于 IPGTT 或糖钳的地方在于其是在正常生理条件下进行的,并保持了肠道对激素的反应,及生理条件下葡萄糖吸收和胰岛素分泌的动力学。GTT 的结果可能显示糖耐量正常或异常。糖耐量下降,即血糖曲线高于野生型,通常提示该个体糖清除能力较

        胰岛素耐受实验

        胰岛素耐受实验的基本过程可分为如下几步:A. 小鼠准备每组实验(如不同基因型或给药组)小鼠数量不得少于 6 只,对照组必须是同年龄、同性别的小鼠。于上午 9 点将小鼠换入干净的笼子禁食 6 小时,至下午 3 点。禁食期间,小鼠保持正常的饮水。B. 下午 3 点,开始胰岛素耐受实验。称取每只小鼠的体重,并用标记笔在小鼠尾巴的根部标记序号,以便在实验过程中能快速辨认所测小鼠。C. 将小鼠从笼子中取出,

        小鼠胰岛的分离纯化实验

        对胰岛功能不仅可以体内评估,也可以将胰岛分离出来在培养条件下检测其胰岛素分泌功能,以排除其他组织对整体分析结果的影响,因此分离胰岛作为对胰岛功能独立检测及提取蛋白质或 RNA 用于分子研究都是极为有用的基本操作。

        分离胰岛的糖刺激下胰岛素分泌检测

        分离胰岛的糖刺激下胰岛素分泌检测的基本过程可分为如下几步:A. 准备 12 孔板,每个孔加入 750 μl 的 KRB buffer。B. 在体视显微镜下,将 CO2 培养箱中培养的胰岛用 20 μl 移液器挑选出来,放入 12 孔板中,每个孔放入 15~20 个胰岛,尽量保证各个孔的胰岛大小和数目一致。C. 将 12 孔板于 37 ℃ CO2 培养箱中放置 1 小时,使胰岛适应培养液的转换(从

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