多聚螯合物酶组化实验
蛋白质实验
最新修订时间：
简介
长期以来，许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单，要求多步检测系统简化，但敏感性要进一步提高，使这一技术面临巨大的挑战。在实践中，往往是步骤减少了，敏感性也降低，这是一对矛盾。
一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出，该方法与简单的二步法相比较，具有很高的敏感性、稳定性和特异性。
另一种是以多聚糖为骨架的多聚螯合物，主要用于 PowerVision 法，其敏感性好于 EnVision 法。
第三种是以氨基酸类为骨架的多聚螯合物，主要用于 UIP（universal immunoperoxidase polymer）法，其敏感性基本与 PowerVision 法相同。
内容来源于《免疫组织化学实验技术及应用》
来源：丁香实验
操作方法
1. 石蜡切片常规脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。2. 蛋白酶消化或抗原修复（AR），PBS 洗 3 min×3 次。3. 0.3％ 过氧过氢（H2O2）处理 5 min。4. 蒸馏水洗，置于 PBS 中洗 5 min。5. 加入相应的 Dako EPOS/HRP 试剂，室温孵育 30～60 min。6. PBS 洗 3 min×3 次。7. 0.04％ DAB- 0.03％ H2O2
EnVision 法1. 4 μm 常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。3. PBS 洗 3 min×3 次。4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。5. 适当稀释特异性一抗，37℃ 孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。6. EnVis
UIP 法1. 4 μm 常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。3. PBS 洗 3 min×3 次。4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。5. 适当稀释特异性一抗，37℃ 孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。6. N-His
PowerVision 法1. 4 μm 常规石蜡切片脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。3. PBS 洗 3 min×3 次。4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。5. 适当稀释特异性一抗，室温孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。6. 滴加山羊抗小鼠（或兔）IgG-HRP 多
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