单链 cDNA 的合成实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案利用的是总RNA，因为如果使用18SrRNA作内对照，在后续实验中就不能使用带poly(A)的RNA。并且必须用DNA酶处理RNA，以去除所有污染的基因组DNA。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

单链 cDNA 的合成实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂去除 RNA 酶的双蒸水 10XRT-PCR 缓冲液（去除 RNA 酶的双蒸水，100 mmol/LTris-HCl、pH8.3，500 mmol/LKC1,15 mmol/LMgCl2) 2. 酶和酶缓冲液 MMLV 逆转录酶（100~200U/ul) SUPERaseINRNA 酶抑制剂（20U/ul;Ambion) 3. 核酸和寡核苷酸 d