直接原位 PCR

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2025-08-28

简介

直接原位PCR主要用于分子和细胞水平研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转归。

来源：丁香实验

操作方法

直接原位PCR

一、组织切片和细胞样品的制备 1. 试剂与配置 10%福尔马林；二甲苯；PBS。 2. 操作方法（1）用10%福尔马林固定组织8~15 h，石蜡包埋，切片（4 um），将切片置于新鲜的二甲苯中处理5 min，放入无水乙醇中浸泡5 min，取出，空气干燥；（2）对于培养细胞，可直接制备爬片，也可有PBS洗细胞一次，加10%福尔马林静置过夜，用橡胶刮下细胞；用PBS洗细胞两次，2 0

原位 PCR

一、试剂配制（1）4％多聚甲醛固定液，2% AES 溶液；（2）蛋白酶 K：储存液-用灭菌水溶解蛋白酶 K 粉末至 1mg/mL，-20 °C 贮存；工作液-现用现配，使用 PBS 稀释 150 倍；（3）PCR 缓冲液（10x）500 mmol／L KC1,100 mmol／L Tris-HCl（pH 8.4）， 15 mmol/L MgCl2，0.5% Tween20，1 mg/L BSA；