PCR 产物电泳银染实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

常用的核酸电泳法有两种。

①水平电泳：琼脂糖凝胶，紫外光下判断条带。此法经济省时，但分辨率较低。

②垂直电泳：聚丙烯酰胺凝胶，可见光下判断条带。此法相对费力，但分辨率较高。

分辨率高是聚丙烯酰胺电泳法被优先用于克隆性基因重排条带判断的关键。在聚丙烯酰胺凝胶上较宽弥散被判断为假阳性（阴性）的条带，在琼脂糖胶上却往往由于其分辨性差而被判断为阳性条带。

内容《免疫组织化学实验技术及应用》

来源：丁香实验

操作方法

聚丙烯酰胺凝胶法

30％聚丙烯酰胺的配制：29 g 丙烯酰胺，1 g 亚甲基双丙烯酰胺（丙烯酰胺：亚甲基双内烯酰胺的分子比为 29:1），加 ddH20 至 100 ml，避光，4℃ 保存（丙烯酰胺有神经毒性，避免呼吸进入体内）。1. 制胶1.1 灌胶玻璃板清洗去污剂洗涤，自来水冲净，蒸馏水漂洗，烘干，乙醇浸泡，擦干备用或涂抹硅胶。1.2 隔条长玻璃和短玻璃板配对放入制胶架内，上紧制胶架，再将制胶架放在固定架夹上