脉冲场凝胶中浓缩 DNA 片段的回收

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中，然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵（Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞（Choi et al. 1993) 时是非常有效的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

一、材料 1. 缓冲液和溶液平衡缓冲液（1X TBE，100 mmol/L NaCl，30 μmol/L 精胺，70 μmol/L 亚精胺）溴化乙锭（1 μg/ml) 或适当稀释度的 SYBR Gold 注射/转染缓冲液（10 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5)，0.1 mmol/L EDTA，100 mmol/L NaCl，30 mmol/L 精胺，70 μmol/L 亚