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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存
- 英文名:
LightNing™ DNA Assembly Mix
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
L397983-1kit
英文名:LightNing™ DNA Assembly Mix
纯度或规格:0
SPU:L397983
CAS:-
存储温度:-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验,扩增目标片段 扩增片段与线性化载体、组装预混酶混合反应 转化感受态细胞 · Step 1 · 如果载体上正好有合适插入目标片段的酶切位点,酶切载体使之线性化。为了降低单酶切载体不完全的几率,减少载体自连和提高筛选成功率,强烈建议双酶切——后面一个切点只要距离第一个切点 5 个碱基以上就行(主要是给两个酶留出结合空间)。如果没有合适的酶切位点,根据选定插入位点设计引物,用反向 PCR 来获得线性化载体。在多片段组装克隆的世界里,凡是酶切搞不定的,统统 PCR 引物设计搞定。简单粗暴有效。 ·
,然后组装便可获得未知片段的碱基序列。 三、单分子测序法(single-molecule seguencing) 单分子测序法是美国Los Alames国家实验室(LANL))发展的一种通过检测标记在单个分子上的荧光进行DNA快速测序的方法。模板DNA分子首先通过酶法修饰或合成,使不同的荧光素标记不同的碱基,然后,用两个激光束(或称激光镊子lasertweezer)夹住标记的DN A分子,将其置于液流系统,从被固定的核苷酸上游端开始用外切酶逐一切下被标记的核苷酸,通过单分子荧光探测器检测液流中
《分子克隆》 虽然伟大的、人手必备的“分子生物学宝典”——《分子克隆》——里涵盖了分子生物学领域几乎各种基础技术(新中文版三册足足 3.5 公斤,知识就这么沉重),但实际咱们平时说的分子克隆技术主要是指将含有“目的基因的 DNA 片段”以“体外重组技术”插入某种 DNA 载体上,得到一个重组 DNA 分子。分子克隆技术现在早已算不上是“超酷”的前沿技术,只能算分子生物学基础入门技术,但它依然是整个分子生物学基础的核心之一,熟练掌握分子克隆技术之关键、又快又准地完成分子克隆依然是实验必需的看家
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