聚丙烯酰胺凝胶中 DNA 片段的回收（压碎与浸泡法）

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

从聚丙烯酰胺凝胶中回收 DNA 的标准方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介绍的“压碎与浸泡”技术。洗脱下来的 DNA 通常不含有酶抑制物及对细胞转染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需时间长，但是工作量小。回收率少于30%~90%，视 DNA 片段大小而定。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收（压碎与浸泡法）

一、材料 1. 缓冲液和溶液丙烯酰胺凝胶洗脱缓冲液（0.5 mol/L 乙酸镁，10 mmol/L 四水乙酸镁，1 mmol/L EDTA (pH 8.0)，0.1%（m/V）SDS（可选或不选））氯仿乙醇 6X 凝胶载样缓冲液酚：氯仿（1:1, V/V）乙酸钠（3 mol/L, pH 5.2) TE (pH 8.0) 2. 凝胶聚丙烯酰胺凝胶适宜浓度的聚丙烯酰