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- 提供商:
晶莱生物
- 服务名称:
Goldner三色法染色
- 规格:
切片
骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法、Goldner三色染色法等。Goldner三色染色又称戈德纳三色染色,与Masson三色染色类似,三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
Goldner三色染色液染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。该染液多用于骨类物质的染色,对细胞染色效果较好,尤其适用于代谢性疾病(Paget病、骨性营养不良等)的研究,以评估成骨细胞和破骨细胞的活性,并容易辨认骨髓中的转移性肿瘤细胞。
【自备材料】
1、系列乙醇
2、蒸馏水
【使用方法】
1、切片二甲苯脱蜡或脱塑料,乙醇漂洗,入水。
2、入配制好的Weigert铁苏木素染色20~30min。
3、流水冲洗1min,用酸性分化液迅速分化(一般<5s)。
4、流水冲洗5min,蒸馏水稍洗。
5、入Acid Ponceau染色液染色5min。
6、在上述过程中按蒸馏水:弱酸溶液=4:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗15~30s。
7、入Orange G染色液染色,直至Ponceau染色液,一般需要3~10min。
8、用配制好的弱酸工作液冲洗15~30s。
9、直接入亮绿染色液中染色5min。
10、用配制好的弱酸工作液冲洗3次,每次15s。
11、蒸馏水冲洗,吸干或晾干,无水乙醇快速脱水,中性树胶封固。
【染色结果】

| 矿化骨 |
绿色 |
| 类骨质 |
橙色-红色 |
| 软骨 |
紫色 |
| 细胞核 |
蓝色-灰色 |
【注意事项】
1、切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
2、取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染液,一般24h失去染色力。
3、酸性分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
4、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1~1%乙酸溶液予以替代。
5、Orange G染色液染色时在镜下控制,以丽春红脱去为准。
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文献和实验色。 亚甲基蓝染色 染色 观察植物组织的形态结构清晰。 碘-碘化钾染色 染色 淀粉粒呈蓝色或蓝黑色,细胞壁呈绿色。 Goldner三色法染色 染色 细胞核蓝紫色,矿化骨绿色,非矿化骨是橙红色。 PAS-萘酚磺S染色 染色 淀粉粒呈紫红色颗粒,细胞壁呈紫红色,蛋白质呈黄色。 改良苯酚品红染色 染色 染色体呈深的紫红色,背景浅的紫红色或者无色。 网状纤维染色
Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。 试剂: Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。 将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。 Masson丽春红酸性复红液: 丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
按首字母排序(A-V)【A】AgNOR 染色法: 1、试剂配制: (1)AgNOR 染色液: 甲液:明胶 2 g 溶于双蒸水至 99 ml,在 60℃ 使之完全溶解,再加入纯甲酸 1 ml 摇匀待用。 乙液:硝酸银 50 g 溶解于双蒸水中至 100 ml,4℃ 冰箱保存。 (2)AgNOR 工作液 取甲液 10 ml,乙液 20 ml 临用前混合。 2、步骤: (1)切片脱蜡至水 (2)双蒸水洗 2 次 (3)AgNOR 工作液中(25℃)浸染
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