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石蜡/冰冻切片免疫组化

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  • 石蜡/冰冻切片免疫组化
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  • 2026年01月16日
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      晶莱生物

    • 服务名称

      石蜡/冰冻切片免疫组化

    • 规格

      切片

    免疫组化
    应用免疫学基本原理,通过标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分别进行组织和细胞原位检测,从而进行定位、定性及相对定量的研究。
     
    实验意义
    1. 免疫组织化学可应用于恶性肿瘤的病理诊断和科研工作。
    2. 可与组织化学染色方法的形态学诊断相结合,提高疑难肿瘤的鉴别诊断的准确率,并为肿瘤进行进一步的病理分型。
    3. 指导和提供临床治疗方案的选择。
     
    实验步骤
    1. 石蜡切片免疫组化:
    ①67℃烘箱烘片2小时,常规脱蜡至水,用pH 7.4的PBS冲洗三次,每次3 min;
    ②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min,蒸馏水冲洗三次,PBS冲洗三次,每次3 min;
    ③3%H2O2室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS冲洗三次,每次3 min;
    ④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10 min,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗,37℃孵育1-2 h或者4℃孵育过夜;
    ⑤PBS冲洗三次,每次3 min;⑤滴加稀释至适当比例的带标记二抗,37℃孵育10~30 min,PBS冲洗三次,每次3 min;
    ⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液,37℃孵育10~30 min,PBS冲洗三次,每次3 min;
    ⑦显色剂显色,自来水充分冲洗,复染细胞核,酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
     
    2. 冰冻切片免疫组化:
    ①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片,厚度为5~6 μm;
    ②载玻片可不打底,裱片后立刻用电吹风吹干;
    ③染色前需用冷丙.酮4℃固定10~20 min;
    ④PBS洗2次,每次5 min;
    ⑤3%H2O2灭活内源性过氧化物酶20 min,需避光处理;
    ⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似,最后脱水透明封片进行观察。
     
    结果展示
    1. 石蜡切片免疫组化[1]

    产品细节图片1

    2. 冰冻切片免疫组化[2]
     
    产品细节图片2
     
    实验完成周期及交付标准
    1. 实验周期:1-2周
    2. 交付标准:蜡块、切片、染色图片、灰度值分析、柱状图、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
     
    需确认的信息
    1. 样本的种属?
    2. 样本类型(固定的组织or蜡块or切片)
    3. 检测的目的蛋白
    4. 是否提供一抗,公司可代购
    5. 阳性率或者半定量分析要求
    6. 拍照要求
     
    文献参考 
    [1] Jensen K , Rikke KrusenstjernaHafstr?m, Lohse J , et al. A novel quantitative immunohistochemistry method for precise protein measurements directly in formalin-fixed, paraffin-embedded specimens: analytical performance measuring HER2[J]. Modern Pathology An Official Journal of the United States & Canadian Academy of Pathology Inc, 2016, 30(2):180.
    [2] Shi, ShanRong, Liu, et al. Evaluation of the Value of Frozen Tissue Section Used as "Golden Standard" for Immunohistochemistry[J]. American Journal of Clinical Pathology, 2008, 129(3):358.
     

    晶莱生物服务流程
    产品细节图片3


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    该产品被引用文献
    [1] Jensen K , Rikke KrusenstjernaHafstr?m, Lohse J , et al. A novel quantitative immunohistochemistry method for precise protein measurements directly in formalin-fixed, paraffin-embedded specimens: analytical performance measuring HER2[J]. Modern Pathology An Official Journal of the United States & Canadian Academy of Pathology Inc, 2016, 30(2):180.
    [2] Shi, ShanRong, Liu, et al. Evaluation of the Value of Frozen Tissue Section Used as "Golden Standard" for Immunohistochemistry[J]. American Journal of Clinical Pathology, 2008, 129(3):358.
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    • 冰冻切片石蜡切片的免疫组化染色步骤及荧光抗体染色方法

      后,入4℃丙酮固定10分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。   PBS洗,5分钟×3。   用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。   PBS洗,5分钟×3。   下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤(滴加一抗开始)。 石蜡切片免疫组化染色步骤 三步法(以SP试剂盒为例)   1. 石蜡切片脱蜡至水。   2. 蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,如需采用抗原修复,可在此步后进行。   3. 3%H2O2室温孵育5~10

    • 进阶:6 年免疫组化经验总结

      一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。   2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写

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