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- 2025年07月12日
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zhangyuxianggx 各位大侠好！现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上，老师就说让构建载体，具体是什么意思啊？我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒，但是不知下一步该怎么做？恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
【求助】MDCK转染与免疫荧光问题，解决问题追加丁当，谢谢！
. 2. pcDNA3.0是双promoter表达系统吧? 谁做的克隆? 有没有可能克隆过程中酶切损伤了载体功能结构? 3. 双promoter表达系统按理是不可能两个蛋白表达都出现问题的. 可能的解释就是上面第二点了. 4. 推测克隆时是先插入c-myc, 然后在pcDNA3.0/c-myc载体上进一步插入AQP1或UT-B, 得到pcDNA3.0/c-myc+UT-B和pcDNA3.0/c-myc+AQP1. 所以可能是c-myc克隆时损伤了pcDNA3.0结构
xxzjcg 请教构建载体，插于片段670bp，pcDNA3.1质粒5400bp，如果10ul连接体系，插于片段加多少？pcDNA3.1加多少？ woxingwosu pcDNA3.1：片段约为1：3至1：4，其他的成分按照要求来做。 xxzjcg 可是我做了1：4加的，长出几个菌，但菌落PCR是阴性的，请教可能什么原因 cixinkejian 确认下你的
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