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CRISPR /Cas9基因敲
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杭州舒桐生物科技有限公司
基因敲除细胞系
一套
随着ZFN、TALEN和CRISPR-Cas9技术的兴起,基因组编辑领域获得长远的发展。借助靶向基因组编辑工具,我们可以在基因组水平上精确编辑,设计产生全新的细胞株模型。定制精准编辑细胞株模型(genome edited cell line models)是体内研究基因功能的理想工具,已成为现代生物学在基因功能研究、肿瘤治疗和生物制药等领域重要的研究材料。基因组编辑技术(genome editing)是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。DNA修复系统主要通过两种途径修复DNA双链断裂(double-strand break,DSB),即非同源末端连接(Nonhomologous end joining, NHEJ)和同源重组(homologous recombination, HR)。鼓润医疗科技有限公司不断探索基因组编辑在多种细胞系中的应用,已成功在数十种细胞系中实现了高效基因组编辑。基于慢病毒包装技术、转座子技术及 CRISPR/Cas9 靶向基因编辑技术,推出了精准编辑细胞株定制服务,包括基因敲除、定点基因敲入、点突变和定点基因大片段删除。
CRISPR-Cas9这种靶向特异的DNA内切酶切割目的DNA产生双链DNA断裂(DSB),断裂的DNA招募细胞内DNA修复机器进行修复。在没有外源同源DNA序列时,细胞主要通过NHEJ途径将断裂的DSB位点连接起来。NHEJ介导的连接保真性不高,容易产生插入或者缺失(indel),往往导致蛋白质编码基因的移码突变,进而产生基因敲除。
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