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条件性基因敲除
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北京维通达生物技术有限公司
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(2) ES-based条件性基因敲除
条件性基因敲除是通过Cre-LoxP/FLP-Frt重组系统来实现的。在目的基因两端各放置一个LoxP序列,得到Floxed小鼠。将Floxed小鼠与Cre小鼠交配,即可获得目的小鼠。目前公司有2种成熟方案确保服务的成功。
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文献和实验小鼠和大鼠可谓是生命科学实验室里的明星,成功的小鼠和大鼠模型可谓是 「生命科学的好帮手」。很多人想自己设计或是了解条件性基因敲除小鼠,此文供参考。 条件性基因敲除小鼠的设计利用了 Cre/LoxP 或 Flipe/Frt 原理。它们都是位点特异性重组 酶系统。这里以 Cre/LoxP 系统为例。比如在待敲除的一段目标 DNA 序列的两端各放置一个 loxP 序列,得到 flox(flanked by loxP) 小鼠。将 flox 小鼠与带有细胞特异性表达 Cre 的小鼠交配繁殖,以获得在特定
条件性基因敲除的基本原理 Cre / loxP 重组系统条件性基因 敲除主要是通过Cre/10xP或者Ftp/FRT重组系统来实现的。这两个系统都是位点特异性重组酶系统,已发展成为在体内、外进行遗传操作的有力工具。这两个系统的应用,可以使靶基因的表达或缺失发生在试验动物发育的某一阶段或某一特定的组织器官。此外,若与控制Cre或Flp表达的其他诱导系统相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控。1.Cre/loxP系统的原理Cre/loxP系统来源于F1噬菌体,可以介导位点特异的DNA重组
条件性基因敲除的策略 条件性基因 敲人是在特定的时期、特定的组织和器官中使某个基因获得表达,可用于研究致病基因的功能或者构建在特定的条件下、特定的组织和器官中表达某个基因的转基因动物模型。 其基本原理和实施方法与前面介绍的条件性基因敲人非常相似,只不过在构建loxP转基因动物时,靶基因与启动子之间含有一段具有翻译终止密码的基因序列,导致靶基因不能正常翻译。而这段分割序列的两侧各有一个loxP位点,在Cre重组酶存在的情况下可以使loxP位点之间的分割序列缺失,从而使靶基因
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