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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Cinnamyl Alcohol Dehydrogenase (CAD) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
肉桂醇脱氢酶（ Cinnamyl-alcohol dehydrogenase，CAD)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
CAD 是木质素生物合成途径中的关键酶之一，是木质素单体合成反应中的最后一步，催化多种不同的肉桂醛（香豆醛、芥子醛以及松柏醛等）生成与之相应的肉桂醇。该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。测定原理：
CAD 催化肉桂醇和 NADP 生成肉桂醛和 NADPH，在 340nm 下测定 NADPH 生成速率，即可反映 CAD 活性。需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 60mL×1 瓶， 4℃保存； 试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；粗酶液提取：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。2、 样本测定
- 在试剂二中加入 25mL 试剂一充分溶解混匀，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 5min；现配现用（配好后 24h 内用完）；
- 在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 试剂二，混匀，立即记录 340nm 处初始吸光值 A1 和 5min 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A2-A1。
- 按样本蛋白浓度计算：
CAD（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
CAD（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=643×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.05 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T： 反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
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文献和实验相关实验
螯合，从而终止Bad在线粒体膜上对Bcl―2或Bcl―XI。的拮抗作用，使得被释放后的Bcl―2或Bcl―XI．恢复抗细胞凋亡的功能。另外，Akt也能直接抑制半胱氨酸天冬氨酸酶―9(caspase―9)的活性。前半胱氨酸天冬氨酸酶―9(pro―caspase―9)被Akt磷酸化以后丧失活性，从而中断了下游的信号。注：IAP：凋亡抑制蛋白；GH：生长因子；GHR：生长因子受体；Apaf：凋亡蛋白酶活化因子； Cyto―C：细胞色素C；laminBl：核纤素B1 CAD：肉桂醇脱氢酶；PARP：腺苷二
技术资料肉桂醇脱氢酶（CAD)生化试剂盒
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