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- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
H2S content test box
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T
H2S 含量测定试剂盒说明书
微量法 100T/96S注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
H2S 是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的 H2S 对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。测定原理：
H2S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯2胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在 665nm处有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算H2S 含量。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 16mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 8mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂四：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。
试剂五：液体 1.5mL×1 管，4℃避光保存。
样品处理：
- 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
- 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
- 血清（浆）：直接测定。
操作表：
1、 酶标仪预热 30min，调节波长至 665nm。2、操作表
| 空白管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 150 | |
| H2O（μL） | 150 | |
| 试剂一（μL） | 150 | 150 |
| 充分震荡混匀 | ||
| 试剂二（μL） | 150 | 150 |
| 10000g，4℃，离心 10min，去上清，留沉淀 | ||
| H2O（μL） | 150 | 150 |
| 10000g，4℃，离心 10min，去上清，留沉淀 | ||
| 试剂一（μL） | 75 | 75 |
| 试剂三（μL） | 75 | 75 |
| 充分震荡混匀 | ||
| 试剂四（μL） | 75 | 75 |
| 10000rpm，4℃，离心 10min，吸取 200μL 上清于 96 孔板中 | ||
| 试剂五（μL） | 10 | 10 |
| 混匀，25℃静置 5min，测定 665nm 吸光值，记为A 测定和A 空白，ΔA=A 测定-A 空白。 | ||
相关图片：
H2S 含量计算公式：
用 96 孔板测定的计算公式如下标准曲线回归方程为：y = 0.0022x，R2 = 0.9988
- 组织样品
(3) 细胞
H2S（nmol/104 cell）=
ΔA
0.0022
ΔA
0.0022
ΔA
0.0022
细胞数量（万个）ΔA 0.0022
×V 反总÷V 样= 681.8×ΔA
V 反总：反应总体积，0.225mL；V 样：反应中样品体积，0.15mL；V 样总：加入提取液体
积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL
注意事项
最低检出限为 1nmol/mL。
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