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NO含量测试盒

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  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      NO content test box

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/96样

    产品细节图片1

    yi氧化氮(Nitric oxide,NO)含量测定试剂盒

    微量法100T/96S

    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义:

    NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中, 特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。

    测定原理:


    NO 在体内或水溶液中极易氧化生成 NO —,在酸性条件下,NO —与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在 550nm 处有特征吸收峰,测定其吸光值, 可以计算 NO 含量。

    自备实验用品及仪器:

    天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

    试剂组成和配制:

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。(用之前震荡溶解后使用) 试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。(用之前 60℃加热震荡 15min) 样品处理:
    1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,
    加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心 15min,取上清,置冰上待测。
    1. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 15min,取上清置于冰上待测。
    2. 体液和培养液等其它液态样品:直接测定。
    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3

    测定步骤和操作表:

    1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 550nm。
    2、操作表
      空白管 测定管
    样品(μL)   100
    提取液(μL) 100  
    试剂一(μL) 50 50
    试剂二(μL) 50 50
    混匀,室温静置 15min,于微量石英比色皿/96 孔板,测定 A550,ΔA=A 测定-A 空白

    NO 含量计算:

      1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
    标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986 1、组织样品:
    1. 按样本质量计算
    NO 含量(μmoL/g 鲜重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)×10-3
    = 0.125×(ΔA +0.0103)÷W
    1. 按样本蛋白浓度计算
    NO 含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷(V 样×Cpr)×10-3
    = 0.125×(ΔA +0.0103)÷Cpr


    产品细节图片4

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