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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
69
- 英文名:
NO content test box
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样

yi氧化氮(Nitric oxide,NO)含量测定试剂盒
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义:
NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中, 特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。测定原理:
NO 在体内或水溶液中极易氧化生成 NO —,在酸性条件下,NO —与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在 550nm 处有特征吸收峰,测定其吸光值, 可以计算 NO 含量。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。(用之前震荡溶解后使用) 试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。(用之前 60℃加热震荡 15min) 样品处理:
- 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,
- 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 15min,取上清置于冰上待测。
- 体液和培养液等其它液态样品:直接测定。

测定步骤和操作表:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 550nm。2、操作表
| 空白管 | 测定管 | |
| 样品(μL) | 100 | |
| 提取液(μL) | 100 | |
| 试剂一(μL) | 50 | 50 |
| 试剂二(μL) | 50 | 50 |
| 混匀,室温静置 15min,于微量石英比色皿/96 孔板,测定 A550,ΔA=A 测定-A 空白 | ||
NO 含量计算:
-
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按样本质量计算
= 0.125×(ΔA +0.0103)÷W
- 按样本蛋白浓度计算
= 0.125×(ΔA +0.0103)÷Cpr
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文献和实验【求助】如何根据western显影的黑白程度来计算他们的具体含量
hooray365 western结果显示各种检测蛋白的量不一样,但具体多少不知道,有什么软件可以计算出来么,请高手指点,算出相对含量也可以 fangweibin119 ImageQuant TL读取积分光密度值 kaige88 http://signal.dxy.cn/bbs/post/view?bid=74&id=14981821&sty=1&tpg=1&age=0
WB 实验在提取完蛋白质后,就要对蛋白含量进行测定 测定方法如下: 一、制作标准曲线 1、从-20℃ 取出 1 mg/ml BSA,室温融化后,备用。 2、取 18 个 1.5 ml 离心管,3 个一组,分别标记为 0 μg,2.5 μg,5.0 μg ,10.0 μg ,20.0 μg ,40.0 μg。 3、按下表在各管中加入各种试剂。 4、混匀后,室温放置 2 min。在生物分光光度计上比色分析。 二、 检测
一、目的学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法,熟悉紫外分光光度计的基本原理和使用方法。二、原理核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统(-C=C一C=C-),能够强烈吸收250-280nm 波长的紫外光。核酸(DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm 处。遵照Lambert-Beer 定律,可以从紫外光吸收值的变化来测定核酸物质的含量。在不同pH 溶液中嘌呤、嘧啶碱基互变异构的情况不同,紫外吸收光也随之表现出明显的差异,它们的摩尔消光系数也随之不同











