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葡萄糖脱氢酶(GCDH)试剂盒

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  • 2025年07月18日
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    • 英文名

      Glucose dehydrogenase (GCDH) kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8°C

    • 规格

      100管/96样

    产品细节图片1
    β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GD)试剂盒说明书

    微量法 100 管/96 样

    正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义

    β-GD 广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液 β-GD 活性对于研究胃癌具有重要的意义。

    测定原理

    β-GD 催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。

    需自备的仪器和用品

    可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

    试剂的组成和配制

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 2mL 蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍
    -20℃保存;
    试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂四:1μmol/mL 标准储备液 10mL,4℃保存;

    样品测定的前处理

    按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
    提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

    测定步骤

    1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
    2、样本测定
    试剂名称(μL) 加样孔
    测定管 标准管 空白管
    试剂一 20 20 20
    试剂二 20 20 20
    样本 10    
    1μmol/mL 标准液   10  
    蒸馏水     10
    混匀后,37℃反应 30min
    试剂三 150 150 150
    混匀, 540nm 下测定各管吸光值
    注意:标准管和空白管只需测一次。
     

    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3

    β-GD 活性计算

    1. 按样本鲜重计算:
    单位定义:每小时每 g 鲜重样品中催化产生 1μmol 酚酞的量为一个活力单位。
    β-GD(μmol/h/g 鲜重)= (C 标准管×V1)×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
    ÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
    1. 按样本蛋白浓度计算:
    单位定义:每小时每 mg 组织蛋白催化产生 1μmol 酚酞的量为一个活力单位。
    β-GD(μmol/h/mg prot)= (C 标准管×V1)×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
    ÷(V1×Cpr)÷T=2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
    C 标准管:标准管浓度, 1μmol/mL;V1:加入样本体积:0.01mL;V2:加入提取液体积, 1mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

    产品细节图片4

     

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