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- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Non-protein sulfhydryl test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
非蛋白巯基测定试剂盒
分光光度法 50 管/24 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
测定原理
巯基基团与 5,5’- 二硫代-双-硝基 甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在 412nm 处有最大吸收峰。自备实验用品
天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL 玻璃比色皿、乙醇和蒸馏水。试剂组成和配制
提取液：液体 50 mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 40 mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 2mL×1 瓶，4℃避光保存。样品的制备- 按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入
- 血清，培养液：取 0.1mL 样本，加入 0.4mL 提取液，混匀，室温静置 10min, 然后 8000g， 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
操作步骤
1、分光光度计预热 30min，调节波长至 412nm，双蒸水调零。2、操作表
在 1mL 玻璃比色皿中加入如下试剂
| 对照管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 200 | 200 |
| 试剂一（μL） | 750 | 750 |
| 试剂二（μL） | 50 | |
| 乙醇（μL） | 50 | |
| 混匀，25℃静置 10min， 测定 412nm 吸光值，ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管设一个对照管。 | ||
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计算公式
非蛋白巯基标准曲线：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x 为标品浓度，单位 μmol/mL， y 为吸光度ΔA。- 组织：
- 按样本重量计算
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
- 按样本蛋白浓度计算
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
- 血清、培养液：
V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；5：血清，培养液等液体样本稀释倍数；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
注意事项
最低检出限为 10μmol/L。
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文献和实验基于MS强度或计数的数据依赖法非标记定量蛋白质组学的蛋白质互作分析（一）
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