- ￥220
- Xkbio
- XK-SJH-A469
- 国产
- 2025年07月15日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Pepsin test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒
分光光度法 50 管/24 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别， 慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。测定原理：
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的 深浅与胃蛋白酶活性呈正比。自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 25 mL 试剂二充分溶解。试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 25 mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 30 mL 蒸馏水充分溶解。试剂六：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
标准品：液体 1.26mL×1 支，0.5 μ mol/mL 酪氨酸标准溶液浓度 4℃保存。粗酶液提取：
组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即粗酶液。
测定步骤：
- 分光光度计预热 30min，调节波长到 580 nm，蒸馏水调零。
- 试剂三和试剂四置于 37℃水浴预热 30min。
- 标准管：取玻璃比色皿，加入 100μL 标准品，200μL 试剂二，600μL 试剂五，100μL 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 标准管。
- 空白管：取玻璃比色皿，加入 100μL 蒸馏水，200μL 试剂二，600μL 试剂五，100μL 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 空白管。
- 对照管：取 EP 管，加入 500 μL 蒸馏水，置于 37℃水浴保温 10min；加入 500μL 试剂四， 盖紧后摇匀 1min；加入 100μL 粗酶液，混匀后 8000g 4℃离心 10 分钟取上清；在玻璃比色皿中加入上清液 100μL，再加入 200μL 试剂二，600μL 试剂五，100μL 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 对照管。
- 测定管：取 EP 管，加入 100μL 粗酶液，500 μL 试剂三，置于 37℃水浴保温 10min；加入 500μL 试剂四，盖紧后摇匀 1min；8000g 4℃离心 10 分钟取上清；在玻璃比色皿中加入上清液 100μL，再加入 200μL 试剂二，600μL 试剂五，100μL 试剂六，混匀后室温静置 20min，于 580 nm 测光吸收，记为 A 测定管。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。计算公式：
(1) 按照蛋白浓度计算活性单位定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1nmol 酪氨酸为 1 个酶活单
胃蛋白酶活性（nmol/min/mg prot）=C 标准品×（A 测定管－A 对照管）÷（A 标准管－A 空白管）×稀释倍数÷（Cpr×V1）÷T=5500×（A 测定管－A 对照管）÷（A 标准管－A 空白管）
÷Cpr
C 标准品：标准品浓度，0.5 μ mol/mL 酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL）， 100μL=0.1 mL；T：催化反应时间（min），10min。
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：37℃每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1nmol 酪氨酸为 1 个酶活单位。胃蛋白酶活性（nmol/min/g 鲜重）=C 标准品×（A 测定管－A 对照管）÷（A 标准管－A 空白管）×稀释倍数÷（W×V1÷V2）÷T=5500×（A 测定管－A 对照管）÷（A 标准管－A 空白管）÷W
C 标准品：标准品浓度，0.5 μ mol/mL 酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；W：组织质量（g）；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL= 0.1 mL；V2：粗酶液总体积（mL），1mL；T：催化反应时间（min），10min。
注意事项
试剂三、试剂四、试剂五临用前配制，配制好用不完的试剂 4℃可保存一周。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
。6）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体。7）滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时（4℃过夜后在37℃复温45分钟）。8）PBS洗三次每次2分钟。9）滴加生物素化二抗,20℃～37℃ 20 分钟。10）PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11）滴加试剂SABC，20℃～37℃ 20 分钟。12）PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13）DAB 显色：DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色（镜下掌握显色程度）。14）蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15）脱水、透明
技术资料
