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- 2026年05月27日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
α-Galactosidase (α-GAL) Biochemical Detection Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
α-半乳糖苷酶（α-Galactosidase, α-GAL）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能专一地催化 α 半乳糖苷键的水解，主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL 对于植物种子的萌发至关重要，种子萌发初期，其催化产生的 D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗，为种子的萌发提供最初的能量来源，后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。测定原理：α-GAL 分解对-硝基ben-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基ben酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，
通过测定吸光值升高速率来计算 α-GAL 活性。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
相关图片：
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。2、样本测定（在 EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一 | 200 | |
| 蒸馏水 | 200 | |
| 试剂二 | 250 | 250 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 试剂三 | 1000 | 1000 |
α-GAL 活性计算：
标准条件下测定的回归方程为 y =0.00543x -0.0027；x 为标准品浓度（nmol/mL），y 为吸光值。- 按样本蛋白浓度计算：
α-GAL 活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
- 按样本鲜重计算：
α-GAL 活力(nmol/min /g 鲜重)＝[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
α-GAL 活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V 反总：反应体系总体积，0.5mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500 万；T：反应时间，30min。
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文献和实验试剂盒 通过测定脂肪酸β氧化过程中的中间产物和关键酶，可以进一步探究机体内脂肪酸β氧化在能量产生、代谢调节、维持脂质平衡以及相关疾病调节机制等方面的作用。推荐使用索莱宝生化试剂盒：BC0645肉毒碱棕榈酰转移酶（CPI-Ⅰ）活性检测试剂盒、BC0670/BC0675游离肉碱/总肉碱含量检测试剂盒、BC0760/BC0765脂酰辅酶A合成酶（ACS）活性检测试剂盒、BC0775短链酰基辅酶A脱氢酶（SACD）活性检测试剂盒、BC0785中链酰基辅酶A脱氢酶（MACD）活性检测试剂盒、BC0795长链酰基
染色30–40min 4、60%异丙醇快速分化背景，纯水漂洗 5、显微镜拍照 6、定性观察：脂滴被染成红色，可直观判断分化比例与脂滴大小分布。 7、定量检测：染色后的细胞用异丙醇洗脱结合的油红O，收集洗脱液后在 510 nm波长下测定吸光度（OD 值），OD 值与细胞内甘油三酯含量正相关，可量化比较不同组的分化程度。 3.BODIPY荧光染色（脂滴荧光标记） 绿色荧光标记中性脂质，可联合DAPI染细胞核，用于脂滴大小、数量统计。 4.生化定量：胞内甘油三酯TG含量 裂解细胞，使用TG检测试剂盒
复旦、中科院、中山医、北京医科大学生化试题（题有些老，但是很有用的，申请加点分!!XIEXIE) Sample TextSample TextSample Text 生物化学试题 复旦大学医学院硕士生生物化学（专基）试题（2001） 一、名词解释 1、DNA和CDNA2、亮AA拉链3、限制性内切酶4、巴斯德效应5、肽单元 6、Ribozyme7、酮体8、结合型胆酸9、内含子和外显子10、氧化磷酸化 二、问答题 1、胰岛素降低血糖的机制。2、血氨的来源及去路。3、试述真核
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