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- Xkbio
- XK-SJH-A436
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Free fatty acid content test kit-test serum, animal tissues, microorganisms, cells
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
游离脂肪酸（FFA）含量试剂盒（测血清、动物组织、微生物、细胞）
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
游离脂肪酸，也称为非酯化脂肪酸，在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。
测定原理：
用有机溶剂萃取 FFA。含有 FFA 的有机液与三 醇胺铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA 一 Cu。Cu 离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与 Cu 离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律，因此可利用此反应进行比色。自备的仪器和用品：
酶标仪、离心机、可调式移液器、96 孔板、蒸馏水。试剂的组成和配制：
萃取液：液体 120 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂三：粉剂×1 瓶，室温保存；试剂四：液体 12 mL×1 瓶，4℃保存；
样本前处理：
- 动物组织：按照动物组织质量（g）：萃取液 mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 萃取液），进行冰浴匀浆。震荡提取 15min，5000 rpm 4℃离心 5min，取有机相待测。
- 血清：吸取 50 μL 血清样本，加入 1 mL 萃取液，震荡提取 15 min 后，4℃，5000 rpm 离心 5 min，取有机相待测。
- 微生物、细胞：按照细胞数量（104 个）：萃取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1 mL 萃取液）加入萃取液，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 2 秒，间隔 3 秒，总时间 3min）；震荡提取 15 min，然后 5000 rpm 4℃离心 5min，取有机相待测。
测定步骤：
1、 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 550 nm。2、 工作液的配制：临用前根据用量按照试剂一（V）：试剂二（V）：试剂三（m）=1（mL）：
1（mL）：0.66（g）的比例充分混匀。（注意：现用现配，用多少配多少，在空瓶中配制，试剂盒中带有 4 个空瓶，先将试剂一与试剂二混合，最后再加入试剂三粉剂）
3、测定管：吸取600μL样本，加入200μL工作液，盖紧后震荡20 min，4℃，5000 rpm离
心5 min，分层后取200μL上层有机相，加入100μL试剂四，摇匀，10 min后测定550 nm的吸光值，记为A测定。
4、空白管：吸取600μL萃取液，加入200μL工作液，盖紧后震荡20 min，4℃，5000 rpm离
空白管只需测一次。△A=A测定-A空白
注意：1、有机溶剂易挥发，加入96孔板后应尽快检测。
2、测定管中加入的样本即样本前处理中的有机相待测液。
相关图片：
FFA 含量计算：
标准曲线：y = 0.0161x - 0.0141 R2 = 0.9985 x：棕榈酸标准品浓度（nmol/mL）y：吸光值差值△A
1、血清 FFA 含量计算：
FFA 含量(μmol/mL)=(△A+0.0141)÷0.0161×V 1÷(V3×V1÷V2)÷1000
=1.242×(△A+0.0141)
2、动物组织、微生物、细胞中 FFA 含量计算：
- 按样本蛋白浓度计算
=0.062×(△A+0.0141)÷W
- 按样本蛋白浓度计算
=0.062×(△A+0.0141)÷Cpr
V1：加入样本体积，0.6mL；V2：萃取液体积，1mL；V3：加入血清（浆）体积，0.05 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：动物组织样品质量，g； 1000：1 μmol=1000 nmol 。注意事项：
- 蛋白含量不可直接用萃取液提取的有机相待测液直接测定，可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的BCA 法蛋白含量测定试剂盒。
- 最低检出限为 20 nmol/mL。
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文献和实验Science：心脏的全面定量代谢图谱，发现心力衰竭的心脏燃料使用异常
表示从蛋白水解中释放出来，蓝色表示释放入血的氨基酸。阴影与氨基酸摄取或分泌成正比） 非心衰与心衰患者心肌对燃料的使用不同 接下来，研究者计算出所有代谢物对心脏耗氧量和 ATP 产生的贡献。心脏需要的血浆氧，心脏的耗氧量，以及测得的代谢产物在动静脉梯度中约占所测氧气消耗量比值，对于这些指标，研究者均进行了精细的量化。对于心脏 ATP 的来源，研究者假设约 35％的脂蛋白衍生的游离脂肪释放入冠状窦，那么计算出超过一半的心脏 ATP 产生自游离脂肪酸，以及近三分之一的 ATP 来自脂蛋白衍生的游离
膜中。与磷脂酶 A2 不同，不一定为 Ca2 所促进。（ 3）磷脂酶 B： EC3． 1． 1． 5，它能水解磷脂类的二个脂肪酸酯。广泛分布于胰脏、小肠、大麦，点青霉（ Penicillium nototum）、草分枝杆菌（ Myco－ bacterium phlei）中，并已从后两种微生物中提纯。因多半结合在细胞内颗粒上，所以提纯困难。酶促反应究竟是通过磷酸酶 A和溶血磷酯酶，还是基于单一的一种酶，尚未判断清楚，有时就用溶血磷酯酶这种别名。（ 4）磷酯酶 C， EC3． 1． 4． 3．
物质在用乙醚浸泡饲料时溶于乙醚，因此总称为粗脂肪。脂肪是动物热能的主要来源，在体内是化学能贮备的最好形式，饲料中脂肪含量越高，所含能值也越高。脂肪也是构成动物组织的重要组成部分，各种器官和组织如神经、肌肉及血液等均含有脂肪。作为饲料中脂溶性维生素的溶剂，脂肪可保证动物对脂溶性维生素的消化、吸收和利用。脂肪酸也分为两大类，即不饱和脂肪酸（脂肪酸碳链中部分碳原子互相以双键相连）及饱和脂肪酸（脂肪酸碳链中碳原子单键相连）。在不饱和脂肪酸中，亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸在动物体内不能合成，必须由饲料供给，称为
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