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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Fructose-1,6-diphosphate (FDP) test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

果糖(fructose ,FT)含量试剂盒
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。
测定原理:
果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在 480nm 下有特征吸收峰。所需的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、蒸馏水试剂的组成和配制:
提取液:液体 100ml×1 瓶,4℃保存;试剂一:1mg/mL 标准液 10mL×1 瓶,4℃保存; 试剂二:液体 40ml×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 15ml×1 瓶, 4℃保存; 试剂四:粉剂 0.5g×1 瓶,常温保存。果糖提取:
称取 0.1~0.2g 样本,常温研碎;加入 1mL 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却后,4000g,25℃离心 10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 1mL 提取液,4000g,25℃离心 10min,取上清液测定。
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测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。2、样本测定(在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂):
| 试剂(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 样本 | 100 | ||
| 试剂一 | 100 | ||
| 蒸馏水 | 100 | ||
| 试剂二 | 700 | 700 | 700 |
| 试剂三 | 200 | 200 | 200 |
果糖含量计算:
1、果糖含量(mg/mg prot)=(C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr此法需要自行测定蛋白浓度。
2、果糖含量(mg/g 鲜重)=(C 标准管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C 标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,2mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
注意:最低检测限为 100ng/g 鲜重或 1ng/mg prot
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文献和实验而常常呈S形,S形曲线与氧合血红蛋白的解离曲线相似(图9-1)。 当变构剂与调节亚基(或部位)结合后,变物剂对酶分子的构象发生什么样的影响呢?下面以果-1,6-二磷酸酶为例阐述这一过程。果糖-1,6-二磷酸酶是由四个结构相同的亚基所组成,每个亚基的分子量约为310,000Da。每个亚基上既有催化部位也有调节部位。在催化部位上能结合一分子FDP,在调节部位上能结合一分子变构剂。此酶有两种存在形式,即紧密型(T型、高活性)与松弛型(R型、低活性)。AMP是此酶的抑制变构剂。当酶
-曼氏酶不同,其动力学不符合米曼氏方程式:酶促反应速度和作用物浓度的关系曲线不呈矩形而常常呈S形,S形曲线与氧合血红蛋白的解离曲线相似(图9-1)。 当变构剂与调节亚基(或部位)结合后,变物剂对酶分子的构象发生什么样的影响呢?下面以果-1,6-二磷酸酶为例阐述这一过程。果糖-1,6-二磷酸酶是由四个结构相同的亚基所组成,每个亚基的分子量约为310,000Da。每个亚基上既有催化部位也有调节部位。在催化部位上能结合一分子FDP,在调节部位上能结合一分子变构剂。此酶有两种
亚基(或部位)结合后,变物剂对酶分子的构象发生什么样的影响呢?下面以果-1,6-二磷酸酶为例阐述这一过程。果糖-1,6-二磷酸酶是由四个结构相同的亚基所组成,每个亚基的分子量约为310,000Da。每个亚基上既有催化部位也有调节部位。在催化部位上能结合一分子FDP,在调节部位上能结合一分子变构剂。此酶有两种存在形式,即紧密型(T型、高活性)与松弛型(R型、低活性)。AMP是此酶的抑制变构剂。当酶处于T型时,因其调节部位转至聚合体内部而难以与AMP结合,故对AMP不敏感而表现出较高的活性。在第一个AMP分子
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