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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Glycolate Oxidase Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
乙醇酸氧化酶（glycolate oxidase, GOX）试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.1）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。
测定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸ben肼反应生成乙醛酸苯腙，在324nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）。试剂组成和配制
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 5mL 双蒸水溶解；用不完的试剂分装后-20℃ 保存，禁止反复冻融。
试剂三：液体 2mL×1 支，4℃保存。
酶液提取
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定操作表
| 测定管 | |
| 样本（μL） | 10 |
| 试剂一（μL） | 130 |
| 试剂二（μL） | 40 |
| 试剂三（μL） | 20 |
| 充分混匀，立即于微量石英比色皿/96 孔板中测定 324nm 处 10s 和 190s 吸光值 A1 和A2，△A=A2- A1 |
|
相关图片：
酶活性计算公式
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
DA
-
- 按照样本质量计算
DA
ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，3min
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
DA
-
- 按照样本质量计算
DA
ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17L/mmol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr： 样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，3min
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文献和实验相关实验
实验42 乙醇酸氧化酶活性测定（比色法） 原理 乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用，在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢，反应如下： 如果我们以二氯靛酚作为氢受体，接受乙醇酸氧化时脱下的H ，使二氯靛酚还原，此时原来为蓝色的染料则褪至无色，其反应如下： 利用染料颜色的变化，即可对酶的活性进行比色
乙醛酸 glyoxylic acid CHOCOOH。为醛酸之一。由乙醇酸在肝脏或叶的乙醇酸氧化酶作用下，或在叶中在乙醇酸氧化酶（依赖 NAD ）作用下而产生。在肝脏或肾脏中甘氨酸及甲氨基（代）乙酸，在甘氨酸氧化酶作用下氧化也可产生。另外，瞟呤代谢的中间产物的尿囊酸在尿囊酸酶的作用下分解，产生尿素和乙醛酸。乙醛酸循环的中间产物异柠檬酸在裂解酶的作用下产生琥珀酸和乙醛酸，后者与乙酰 CoA合成苹果酸。在微球菌属（ Micrococcus）作为乙醛酸代谢的中间产物，与甘氨酸结合
乙醇酸 glycolic acid 在细菌的戊糖发酵或植物的光合作用中，经乙醛酸酶还原而形成乙醇酸。在高等植物中可通过广泛在的乙醇酸氧化酶氧化形成乙醛酸。再进一步氧化而成草酸，脱羧变成甲酸
技术资料乙醇酸氧化酶测试盒
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