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- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Fructose-1,6-bisphosphatase (FBP)/fructose-1,6-bisphosphatase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
果糖-1,6-二磷酸酶(Fructose 1,6-bisphosphatase，FBP)试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义
果糖-1,6 二磷酸酶又称果糖 1,6 二磷酸酯酶，催化 1,6 二磷酸果糖和水生成 6 磷酸果糖和无机磷，在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。测定原理
FBP 催化 1,6 二磷酸果糖和水生成 6 磷酸果糖和无机磷，在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm 下测定NADPH增加速率，即可计算 FBP 活性。需自备的仪器和用品
分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制
提取液一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。提取液二：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 20mL 试剂四充分溶解待用，用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂二：液体 7.2μL×1 支，4℃保存；临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂
4℃保存；
试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存；临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂四：液体 25mL×1 瓶， 4℃保存；
样本的前处理
①总 FBP 酶提取：建议称取约 0.1g 样本，加入 1mL 提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎 3s，间歇 7s，总时间 1min），然后 4℃，8000g 离心 10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体 FBP 酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5～10 的比例（建议称取约 0.1g 样本，加入 1mL 提取液一），冰浴匀浆后于 4℃，200g 离心 5min，弃沉淀，取上清在 4℃，8000g 离心 10min，取上清用于测定胞浆 FBP 酶活性，取沉淀加 1mL 提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎 3s，间歇 7s，总时间 1min），然后 4℃， 8000g 离心 10min，取上清测定叶绿体中 FBP 酶活性。
建议测定总 FBP 酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的 FBP， 则按照步骤②提取粗酶液。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。2、 将试剂一、二、三 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 10 分钟。
3、 加样表：
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 样本 | 20 |
| 试剂二 | 10 |
| 试剂三 | 10 |
| 试剂一 | 160 |
相关图片：
FBP 活性计算
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按样本蛋白浓度计算
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T： 反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
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文献和实验果糖才是肥胖的真凶？Nature 最新文章揭示高果糖饮食如何
，丙酮酸与磷酸烯醇丙酮酸（PEP）的比例显著降低，与丙酮酸激酶的抑制效果一致。此外，PKM2 在缺氧组织中的表达很高，例如肿瘤和肠绒毛等。图片来源：Nature果糖主要由糖转运蛋白 GLUT5 转运到肠细胞中，然后被 KHK 磷酸化形成 1-磷酸果糖（F1P）。由于 F1P 在结构上类似于 PKM2 的内源性调节因子 1,6-二磷酸果糖（FBP），因此作者假设 F1P 可能直接抑制 PKM2 的活性。研究发现，F1P 会与 FBP 竞争结合 PKM2 的同一位点，而且一旦结合就能够直接抑制 PKM
：酶亚基上的催化部位 X：酶亚基上的调节部位 FDP：果糖-1，6－二磷酸 变构效应剂可以是酶的底物，也可以是酶系的终产物，还有的是与它们结构不同的其他化合物，一般说，都是小分子物质。一种酶可有多种变构效应剂存在。 果糖－1，6－二磷酸酶的变构过程是T型与R型的可逆转变。有些酶的变构效应还可表现为酶分子的聚合或解聚，如乙酰CoA羧化酶，它是脂肪酸合成过程中的关键酶。它是由四种不同亚基构成的原聚体，每个亚基有不同的功能，分别是：生物素 载体
光合碳循环 （photosynthetic carbon cycle）
与 3个 CO2 形成 6个 GAP， 5个 GAP经过一系列的异构化、缩合与重组，消耗 3个 ATP，再合成 3个 RuBP，净生产一个 GAP。 GAP是合成各种有机物质的碳架，可在叶绿体中合成淀粉等物质，又可透过叶绿体被膜上的起跨膜传递作用的蛋白称为 P1-运转器输出叶绿体外，合成蔗糖等物质。 特有的酶 氧化戊糖磷酸途径酶系统的发现促进了光合碳循环各步骤酶系统的分离。其中核酮糖 -1， 5-二磷酸羧化酶、核酮糖 -5-磷酸激酶、景天糖 -1， 7-二磷酸酯酶是此循环特有的酶。循环中的 RuBP羧化
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