- ￥931
- omiget
- Omc-02
- 北京
- 2025年10月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
3年
- 供应商：
科邦兴业（北京）科技有限公司
- 保存条件：
4 ℃保存
- 规格：
1ml
产品 简介
Omifection-R 是一款专门用于 siRNA 转染的试剂，转染效率高，细胞毒性低，在多种细胞系及
原代细胞中都表现出良好的转染效果。
特点与优势
1. 转染效率高。与 Lipofectamine 2000 或 RNAi Max 等转染试剂的转染效率类似。
2. 细胞毒性低。在多种类型的细胞转染实验中，Omifection-R 没有表现出细胞毒性。
3. 使用方便。本产品不受血清和抗生素的影响，转染前不用更换细胞培养液。
使用说明
1. 以 6 孔细胞培养板培养的贴壁细胞为实验体系，转染实验流程如下：
2. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞并计数，接种到 6 孔细胞培养板，培养 24 h 后细胞密度达到
30%-50%。 （ 细胞 密度太大不利于转染 ）
3. siRNA 制备。利用 RNase-free ddH 2 O 溶解 siRNA 干粉，终浓度为 20 μM，即利用 125 μL 的
RNase-free ddH2O 溶解 1 OD（33 μg 或 2.5 nM）siRNA 干粉，充分震荡（vortex）使其溶解。
4. 转染复合体制备。准备 2 个无菌 EP 管，各加入 100 μL OPTI-MEM 培养液 (Gibco），其中
一管加入 6 μL Omifection-R，混合 10 次，室温静置 5 min。另外一管加入 6 μL siRNA（20 μM）
溶液，混匀。将 Omifection-R 混合液滴加到 siRNA 混合液中，混匀，室温静置 30 min（5-30
min，但孵育 30 min 转染效果更好），制备转染复合体。
5. 细胞转染。将转染复合体滴加入细胞培养液中，轻摇混匀，转入 CO 2 培养箱中继续培养。
6. 换液。转染 6-12 h，更换成新鲜的细胞培养液。若无明显细胞毒性，也可不用换液。
7. 转染 24-48 h，利用 RT-PCR 检测目的基因 mRNA 表达水平，或利用 Western blot 检测目的蛋
白表达水平。
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文献和实验50 代以内的细胞。50 代以后的细胞不建议采用，因为转染效率会随时间的推移而下降。 6.避免使用抗生素 从铺盘直到转染后 72 小时内，应避免使用抗生素。在转染的细胞中，已经显示出抗生素积累到了毒性水平。为获得最佳的siRNA输送效果，某些细胞和转染试剂需要无血清的条件。我们建议在正常的生长培养基和无血清培养基中均做转染试验，以确定每个转染实验的最佳条件。 7.使用优化的试剂转染 siRNA 请使用您的细胞类型适用的最佳 siRNA 转染试剂和试验方案。对于 siRNA 试验，转染试剂的选择
docado 我要做乳腺癌细胞siRNA瞬时转染，不知道哪里的转染试剂比较好用、可靠。 Invitrogen公司的脂质体LipofectamineTM-2000 德国QIAGEN公司Attractene Transfection Reagent 北京英恩格公司的EntransterTM -R 这些是否有人用过，转染
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种，这些方法各个实验室都有用过，但最常用的是使用转染试剂，这些转染试剂有的是阳离子脂质体，有的则不是。下文除了介绍各种转染方法外，在文章末尾还列出了常用的RNAi转染试剂。 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒
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