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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
69
- 英文名:
Urea Nitrogen Test Box
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

尿素氮(BUN)试剂盒
分光光度法 50T/48S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功 能的主要指标之一。
测定原理
样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一种红色的二嗪化 合物,其颜色的深浅与尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。自备实验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存, 试剂二:液体 60mL×1 瓶,4℃避光保存。样品处理1. 组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL
蒸馏水)加入蒸馏水,匀浆后于 25℃,10000g 离心 10min,取上清待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):蒸馏水体积(mL )为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒, 总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体:直接检测。
测定操作
| 空白管 | 测定管 | |
| 样品(μL) | 40 | |
| H2O(μL) | 40 | |
| 试剂一(μL) | 100 | 100 |
| 试剂二(μL) | 1000 | 1000 |
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尿素氮含量计算:
标准条件下测定回归方程为 y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)
2、按照样本质量计算
尿素氮含量 mg/g 鲜重)= (△A-0.0229)÷2.048×V 样总÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白浓度计算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr
V 样总:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500: 细菌或细胞总数,500 万。
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