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- 技术资料
- 服务名称:
高纯度或无内毒素质粒提取
- 规格:
P4170-10MG
技术服务详细描述
客户将siRNA片段克隆到目的表达载体后,需制备大量高纯度或无内毒素的质粒进行下一步实验,为此吉玛公司推出制备高纯度质粒的服务。
服务要求:
1. 客户提供待制备的质粒(>20ng);
2. 质粒的抗性和酶切图谱。
3. 目前接受批量订单(>20),小量制备请来电咨询。
操作流程:
1. 质粒转化大肠杆菌感受态细胞并鉴定;
2. 鉴定成功后大量培养目的细菌
3. 质粒制备。
纯化标准:内毒素<0.1EU/ug DNA
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文献和实验,但是质粒DNA正确复性,仍留在上清溶液中。如何从上清液中回收DNA的方法有很多,有用苯酚/氯仿抽提的,有用乙醇沉淀的,有用核酸吸附吸附的,目的都是试图采用有效,快速的方式纯化质粒DNA。我们提供的试剂盒就是选用特异的核酸吸附材料,优化结合与洗脱条件得到高纯度质粒DNA,纯化的质粒DNA纯度和得率可以满足分子生物学实验的要求。 在提取质粒的过程中,质粒提取的得率和质量与很多因素有关,如宿主菌的种类和培养条件、细菌细胞的裂解、质粒拷贝数、质粒的稳定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟练
pl198242:请问各位大侠:用质粒提取试剂盒从大肠杆菌中提取质粒后,想用于细胞转染,还需要另外的操作来除菌么? 另外是否还需要纯化?丁香园网友boboyuan认为:不需要,当然,前提是你提取质粒时操作是规范的。提完的质粒放-4度保存,转染的时候直接用就行了。丁香园网友hzh_0796认为:看你是用什么方法提得,纯度如何我用小提的时候发现,最后一步用洗脱液洗时将吸附柱放进一个新的EP管时盖子居然盖不上,硬着头皮这样拿去离心,自己都不放心用。后面测了下浓度好低,只有89微克每毫升。看来小提
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