- ￥12000
- IMMOCELL
- IMD-001
- 厦门
- 2025年10月20日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
耐药细胞株
- 细胞类型：
详询
- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 库存：
999
- 英文名：
MCF-7/ADR
- 生长状态：
正常
- 年限：
长期
- 运输方式：
复苏发货或干冰发货（顺丰快递）
- 器官来源：
详询
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
详询
- 组织来源：
腺癌，乳腺，胸水
- 规格：
1*10^6
人乳腺癌阿霉素耐药株 MCF-7/ADR
一、细胞特性
1) 来源：腺癌，乳腺，胸水
2) 形态：上皮细胞样
3) 含量：>1x106 个/mL
4) 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
二、细胞培养步骤
1.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备MEM培养基;优质胎牛血清，10%;添加0.01mg/ml 胰岛素;双抗1%。
2) 培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
2. 细胞处理
1) 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法
a. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
d. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。
3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例
a.细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
b.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
c.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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- 内容
- 询问日期
文献和实验培养条件：RPMI-1640培养液，10%（胎牛或小牛）血清，5%CO2，37度饱和湿度孵箱培养。细胞生长状态：上皮样贴壁生长。传代：细胞长满95%->弃培养液->0.25%胰酶消化2min->弃掉胰酶->加入培养液吹打贴壁细胞，将细胞悬液分瓶传代。若一传二，则3天长满；若一传三，则需要4-5天长满。
我正在培养MCF-7细胞，在此介绍一下我给细胞传代的经验：细胞放在显微镜下观察，细胞无污染、退缩，等其长满培养瓶约70%-80%时即可进行传代操作，具体步骤如下：1、 打开瓶盖，弃上清,2.D-HANK‘S夜（以50ml培养瓶为例，下同）2、吸管清洗后弃之；3、加0.25%胰酶2吸管；4、轻摇晃后置入37度温箱；5、3-5分钟后置显微镜下观察，见细胞胞质退缩，变圆；6、吸去胰酶，加含10%FCS的RPMI1640 3吸管；7、用洗管吹打，见细胞脱落，培养液变混，即可吸出加到新的培养瓶中。注意
happy_840524 请问一下高手，我的MCF-7细胞老是养养就长出触角，而且长出触角后越长越慢，复苏了再养还是这样，我觉得我的培养液和操作都没有问题，因为另外一个细胞养的挺好，请高手指点。 r1990en 我也是这种情况啊，不知道楼主的问题最后是怎么解决的？ 冬天的落阳 我的细胞也这样 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验
