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- IMMOCELL
- 厦门
- IM-R029
- 2026年01月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Embryonic Rat Aortic Smooth Muscle Cells
- 库存：
999
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
贴壁生长
- 品系：
大鼠细胞株
- 组织来源：
主动脉平滑肌
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
大鼠
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
三角形，梭形
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
主动脉平滑肌
- 运输方式：
复苏发货或干冰发货（顺丰快递）
- 年限：
长期
- 生长状态：
正常
- 规格：
1*10^6
A10胚胎大鼠主动脉平滑肌细胞
一、细胞特性
1)来源：主动脉平滑肌
2)形态：三角形，梭形
3)含量：>1x106 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
二、运输和保存
(1)使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。
(2)收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
三、细胞培养步骤
1.培养基及培养冻存条件准备：
1)准备DMEM/F12培养基(DMEM/F12:GIBCO,货号12400024)，90%;小牛血清，10%。
2)培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2.细胞处理：
1)复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
a.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
d.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
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消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶（用20的血清的DMEM配可能更好，有类似文献），分装于青霉素小并，每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化，消化约10几个小时（消化程度的把握要体会），离心后，接种（若见细胞量大，成功把握大），绝对静置3天（没必要看，看多了无益），8天可传代。犬胸主动脉平滑肌贴块法——方法成熟，比消化法好控制的多。1、取材过程要快，取好放4度储存的D-hanks液带入超净台，不然先天不足；2、块大小密度影响不是很大（尽量小），关键
漂洗3次。加入培养液CO2孵箱，37℃，每周换液1次，处理1次。 2、血清浓度，上皮细胞耐受低血清环境的能力较强，而成纤维细胞的耐受力较差，利用这个差异，用含1.5%血清的培养液可以降低培养物中成纤维细胞的生长。 垂体细胞 【ccyy30】我在胚胎大鼠腺垂体细胞的原代培养中发现有好多的成纤维细胞和神经细胞，如何纯化【luoyangu】原代培养中要除去较多的成纤维细胞，在接种细胞于膜插片前，按1～５*１０的５次方个／ml的细胞密度接种到大约5ml 单个细胞悬液到２５立方厘米培养瓶中，原代
