超级核酸酶

超级核酸酶

 

产品货号：FrdE00004

储存温度：2-8℃

来源：E.coli

1、产品简介

超级核酸酶(Benzonase Nuclease)是来源于Serratia Marcescens，经过基因工程

改造的核酸酶。它能够在非常广泛的条件下(6M urea，0.1 M Guanidine HC1 0.4%Triton

X-100，0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF)，降解所有形式的(双链，单链，线状，环状)DNA和RNA。它将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5一单磷酸寡核苷酸。超级核酸酶适用于去除蛋白质产品中的污染，符合FDA关于核酸污染去除的规程。

本产品可以与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量。本公司超级核酸酶经特殊工艺表达纯化，无蛋白酶、内毒素污染，没有标签方便下游实验操作。

表1.超级核酸酶产品性能。

超级核酸	性能
浓度	1mg/ml
酶活	＞25kU/mg
最适合酶活pH	8.0-9.0(可操作范围6.0-9.0）
最适酶活温	37°C （温度范围0-37°C）
蛋白酶活	无
辅助因子	5-10mM Mg 2+
储存缓冲液	20mM  Tris, 20mM NaC|， 2mM,Mgcl2,10%Glycerol,pH8.0，
储存温度	﹣20℃，避免反复冻融

1.2酶活定义

37°C，pH 8.0反应条件下，2.625ml的反应体积，在30分钟内使·A260值降低1.0(相

当于完全消化37 ug鲑鱼精DNA)的酶量定义为一个活性单位(U)。

1.3产品应用

1)去除核酸污染:在蛋白纯化时与细胞裂解液配合，可有效降低样品黏度，利于下游操作;

2)降解核酸，利于不可溶蛋白复性前高质量包涵体的制备;

3)有效去除带负电荷的核酸对蛋白样品分离和检测的影响;

4)疫苗和病毒样品制备过程中DNA污染的去除。

5)减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象。

6)用于对任何蛋白样品结合的核酸的预处理，提高蛋白在2D凝胶电泳中的分辨率。

2.操作步骤

2.1大肠杆菌或者其他细菌样本处理

细菌离心收集后，用10倍体积的TBS缓冲液重悬，菌体破碎后，每毫升菌体裂解液

加入1-2微升超级核酸酶(若添加终浓度为5-10mM的Mg²⁺，则效果更佳)，室温孵育

30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

2.2细胞样本处理

1)贴壁细胞去除培养基，用PBS洗后，100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解

液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实

验。

2)悬浮细胞离心收集后，在离心管中加100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解

液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实

验。

2.3组织样本处理

将30-100毫克动物或者植物组织研磨充分后，加入100-200微升裂解液，同时加入

加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

3.注意事项

1)避免使用磷酸盐缓冲液。

2)含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加

酶的用量。

3)超级核酸酶有超强的试剂兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，

0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，当超过该浓度时核酸酶活性会降低，可通过增加核酸酶量使活性得到补偿。

*本试剂仅供实验室研究使用