生物素连接酶(BirA)

生物素连接酶(BirA)

产品货号：FrdE00020

来源：E.coli

1、产品简介

生物素连接酶(Biotin Ligase,BirA)是大肠杆菌BirA基因编码的双功能蛋白质,能识别蛋白质分子的特异性序列(BirA Substrate Peptide),使蛋白质生物素化。该酶带有6his标签，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA去除。

表1.生物素连接酶产品性能。

超级核酸	性能
浓度	1mg/ml
酶活	＞45kU/mg
最适合酶活pH	8.0-9.0(可操作范围6.0-9.0）
最适酶活温	37°C （温度范围0-37°C）
蛋白酶活	无
辅助因子	5-10mM Mg 2+
储存缓冲液	20mM  Tris, 20mM   NaC|， 2mM,Mgcl2,10%Glycerol,pH8.0，
储存温度	﹣20℃，避免反复冻融

1.2酶活定义

37°C，pH 8.0反应条件下，将1pmol蛋白质或者多肽（融合BSP序列）生物素化所需要的

的酶量定义为一个活性单位(U)。

1.3产品应用

生物素标记融合BSP的蛋白质

2.反应体系

10×Binding   buffer	5ul	1×
BirA	1.5ul	45U/ul
蛋白或多肽	18.5ul	40uM

 

3.注意事项

1)含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加

酶的用量。

2)生物素连接酶有超强的试剂兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，

0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，当超过该浓度时核酸酶活性会降低，可通过增加核酸酶量使活性得到补偿。

*本试剂仅供实验室研究使用