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武汉傲星生物科技有限公司
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检测类
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细胞培养(代养细胞)
细胞增殖:MTT/CCK8检测(96T)
流式细胞凋亡检测
流式细胞周期检测
流式表面抗原鉴定上机检测 Th1、Th2、Th3、Treg、Th17流式鉴定
流式检测细胞吞噬FITC-dextran
外周血淋巴细胞分离
大鼠/小鼠脾脏淋巴细胞分离
外周血单核细胞PBMC分离费用
组织单细胞悬液制备费用
外周血血小板分离
流式分选
细胞刺激-活化-破膜费
ROS活性氧检测(绿光)
ROS活性氧检测(红光)
线粒体膜电位检测(JC-1染色评价线粒体膜电位)
软琼脂集落形成实验费用
平板克隆形成 细胞划痕
成管实验
Transwell迁移
Transwell侵袭
台盼蓝染色
细胞缺氧/氧剥夺/复氧模型(OGD/R模型)
细胞共培养模型构建费
尿酸性肾病HK-2细胞模型构建
细胞成球实验
泡沫细胞模型 Caco-2 单层细胞渗透转运模型
非酒精性脂肪肝的细胞模型构建费NASH
细胞粘附实验
细胞热疗造模
脓毒症细胞模型
细胞计数
白细胞计数
细胞通透性检测费
细胞BrdU染色
细胞EdU染色
细胞实验注意事项:
1.流式检测样本
| 样本形式 | 处理方式 | |
| 血样 | 当天采集的血液,置于抗凝管中,建议血量≥2mL,单个血样对应分组较多时应适当加大采血量 | 4小时之内完成淋巴细胞分离 |
| 组织 | 新鲜标本离体后置于PBS中,4℃保存运输。离体时间不可超过24小时。 | |
| 细胞 | 武汉本地客户可以将培养细胞的孔板交予销售带至实验室,需要用封口膜密封,防止漏液。外地客户需将有活力的细胞置于培养瓶中常温快递至公司检测 |
- 流式细胞样本量≥106个细胞,周期检测样本量≥107个细胞
- 血液≥2ml
2.其他检测
| 检测形式 | 处理方式 | 保存 | 运输 |
| 流式细胞周期检测 | 将细胞正常消化后,冷PBS悬浮细胞,之后缓慢加入4℃预冷无水乙醇固定,乙醇终浓度75% | -20℃ | 冰袋 |
| 流式细胞凋亡检测 | 将细胞正常消化后,PBS洗一遍,PBS重悬 | 必须当天送样 | 冰袋 |
| Tunel细胞凋亡检测 | 有活力的细胞,弃去培养液,PBS冲洗后,加入足量10%福尔马林,培养板附上保鲜膜,盖上板盖,胶布缠裹固定,避免固定液体流出 | 4℃ | 冰袋 |
| 原代分离实验 | 无菌采取完整的组织块,新鲜组织离体后置于无菌培养基中 | 离体时间不可超过4小时 | 冰袋 |
| 血小板的分离 | 需要选择医用真空采血管获得抗凝血,全过程样本均需在20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果,最好在取血2h内进行实验,血液存放时间越长,细胞分离效果越差。血液放置超过6h后分离效果更差甚至不能达到分离目的。 | 4℃ | 冰袋 |
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文献和实验到自己做的时候却又总出问题。据毛老师多年观察,很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患,最常见的问题就是对照设置不合理,最后导致整体实验失败或数据不理想。因此,今天我们来谈谈成功的流式细胞实验设计都需要设置哪些对照。毫不夸张地说,设置合理的对照组是整个实验成功的关键;反过来说,如果你掌握了流式实验如何设置对照的精髓,对整个免疫学相关的实验设计都会有极大地帮助。流式对照至少有 5 种:生物学对照,空白对照,同型对照(Isotype control),补偿对照(也叫单阳性对照)和 FMO 对照,主要目的
在细胞实验室,有很多经验很难总结在书本上,但是与整个实验的成功却密切相关,现在建立新贴,想到哪里说道哪,随时补充并建议高手随时添加内容,大家共享自己实验中积累的小窍门。 1)细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积,原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液,一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存,这实际上并不好。原因如下:冻存液冻存需要一段时间,如果这段时间冻存管倾斜,液体容易流到管口,很容易在后续的操作中造成污染。建议0.5-1ml之间即可。 2)许多教科
丁香园网友zlawrance的观点为:(1)细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积,原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液,一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存,这实际上并不好。原因如下:冻存液冻存需要一段时间,如果这段时间冻存管倾斜,液体容易流到管口,很容易在后续的操作中造成污染。建议0.5-1ml之间即可。(2)许多教科书推荐细胞解冻用37度水,本人发现温度可以适当提高,39度也没有问题,虽然只提高了2度,却可以加速细胞解冻的时间。解冻后有提点挺重要,迅速用75%乙醇消毒冻存
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