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菲优特检测
- 服务名称:
MTT检测技术服务_MTT细胞实验技术服务
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板
MTT检测实验方法概述
MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,在活细胞中作用于线粒体的呼吸链,MTT在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下生成蓝色的formazan结晶,formazan结晶的生成量与活细胞数目成正比,生成的formazan结晶可溶解在DMSO中,利用酶标仪测定570 nm处的光密度OD值,可以反映出活细胞数目和细胞活力。死细胞中由于没有琥珀酸脱氢酶,因此不能还原MTT生成formazan结晶。
特定药物经MTT实验检测相关抗癌活性、经特定细胞模型检测细胞抗氧化损伤活性、筛选药物最佳作用浓度方便后续实验研究。
MTT检测应用范围
1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。
2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,没有放射性,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。
3、一些细胞因子活性的研究
MTT检测技术服务内容
1、细胞培养与接种;
2、处理(如药物处理等);
3、MTT检测及数据分析;
4、技术服务报告提交。
MTT检测实验服务报告内容
1、MTT实验原始数据及分析结果,如曲线图、IC50等;
2、MTT技术服务所需试剂耗材、仪器设备、实验方法各一份。
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文献和实验这段做MTT走了不少弯路,后来看了园子里有许许多多的建议和指导,再做时结果好了很多,心里很是感激,于是把众多的帖子进行了总结,希望对后来者有所帮助!同时感谢各位前辈的良帖!!MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满
MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理:活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的,如果不知道细胞如何养,那就看看相关的文献方法。如果知道了细胞的名字,就可以上www.atcc.org检索细胞的培养信息,这个网站上的培养方法是标准培养方法。当然可以根据自己实验要求进行修改。由于细胞计数很繁琐,点板时的细胞
MTT 结果分析关于如何计算 IC501、改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)Xm:lg 最大剂量I:lg(最大剂量/相临剂量)P: 阳性反应率之和Pm: 最大阳性反应率Pn: 最小阳性反应率举个例子:各药物浓度作用于某肿瘤细胞后所得 MTT 值如下公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率抑制率=1-加药组 OD 值/对照组 OD 值,如对于 100ug/ml 的药物,其抑制率=1-0.080/0.614=0.869,各组抑制率如下:代入计算公式:Pm
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